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标题:【求助】条件敲除小鼠的鉴定

qqshepherd[使用道具]
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发表于 2013-12-19 14:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】条件敲除小鼠的鉴定

请问哪位同学有没有做过条件敲除小鼠的基因型鉴定？我现在的小鼠是条件敲除的小鼠，与E2Cre的小鼠杂交之后在后代的敲除小鼠的鉴定中出现了问题，一直拿不到敲除的小鼠，我们设计了两对引物，分别来区分野生型，杂合子及纯和敲除的。但是不知道为什么在基因型鉴定是纯和之后，蛋白检测仍然有表达！希望高人指点一下！万分感激！
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seagate[使用道具]
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发表于 2013-12-19 14:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
重复基因或者同一个抗体识别不同的蛋白亚型（isoform)
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bangqi_k[使用道具]
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发表于 2013-12-19 14:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 qqshepherd 的帖子

请问您现在的问题解决了吗？我也有同样地问题
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qqshepherd[使用道具]
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发表于 2013-12-19 14:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
没有，我又用了另一种cre，不过刚合笼，不知道结果怎么样呢!
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尘朵朵[使用道具]
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发表于 2013-12-19 14:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你的问题解决了吗？我也遇到了同样的问题
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qqshepherd[使用道具]
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发表于 2013-12-19 14:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
解决了，重新又设计了引物，还有原来的抗体不好用的原因！
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ztonyc[使用道具]
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发表于 2013-12-19 14:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
是什么原因啊？是Cre小鼠的原因吗？
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wzqzy[使用道具]
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发表于 2013-12-19 14:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你用药物诱导了CRE酶吗？如果没有诱导过，目的基因还没有敲下来，肯定能检测到对应蛋白的表达
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