表观遗传学

我们都是在一天内完成的啊，早上制片，下午分带、看片出结果。时间还比较充足。我们都是用50ml生理盐水加0.5g/ml的胰酶1ml混匀后分带啊，生理盐水先在37度水浴中放置30min。加入胰酶混匀后马上分带，一般从38s开始，分完一次后加2S（40s）又开始分第二次，一般只分三次。完了换新的生理盐水和胰酶混匀后继续分。羊水片子时间要短些，从36S开始。

你所说的是不是胰酶浓度太高了。胰酶浓度不能太高。

羊水细胞和绒毛细胞培养和制作染色体的具体步骤我还没有电子版的，等我有空写好了在发给大家一起分享！

楼主有作过骨髓的染色体制备吗?培养时间及各步骤有什么不同吗?还有想问问楼主可做过姐妹染色单体互换实验,能否介绍一下经验?谢谢

经验介绍太简单了，固定液放久了会生成酯类，影响固定效果，另外在脐带血或新生儿血由于 细胞增殖快，常规固定效果常常不好，可以多固定一次用甲醇和冰醋酸按2：1的比例固定。

冰片也不是一定要四个小时，我喜欢上面刚刚有层薄冰时 就OK了。

滴片高度无所谓，高分辨的可以高点滴，常规带嘛10-30厘米高足够了。

秋素的浓度看自己的习惯吧 ，作用时间用过1个小时的，也用过3 个小时的，浓度高的作用时间短点，浓度低的作用时间长点，自己摸好条件。

个人认为用0。025%的姨酶，效果更好

不知道你的具体操作过程，想问下你的烤片时间及温度，我觉得要考虑两个方面的问题，1。片子老化不够或回潮，建议75度2个半小时到3个小时，不要超过4个小时，显带时 要片子自然冷却后再进行，如果天气潮湿又是隔夜显带建议显带前再烤会儿，效果会好点

2 。姨酶的浓度及水浴箱的温度情况，水浴箱温度控制在37+-0.5，姨酶建议用0.025% 的。

谢谢大家的回复，这些只是我个人在自己工作中经验的总结。欢迎大家继续分享自己的实验经验，实验中最关键的不是方法，因为方法都是大同小异。经验才是最重要的。你有了一定的实验经验，比你看书不知道要强多少倍。

我们烤片在70度，烤3个小时左右分带。

我所工作的实验室近半年制的外周血和脐带血片子很差，羊水片子也不好哟～～～～我们寻找了很多原因，结果培养基出了问题，湖南湘雅基因公司和广州拜迪公司的外周血培养基近段时间都不是很好，

希望那位楼住给我推荐一下你们用的 培养基，谢谢～～～

我们的胰酶浓度也是0.025%,烤片方法:37度24-36小时

是不是可以考虑用75度烤片法，只要3个小时就好了，可以节约很多时间的阿

这是我国夏家辉院士在75年创造的，技术很成熟的