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标题:[未解决]请教,最近所做样品不稳定,不知是何原因

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
jenny0121[使用道具]
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1
 

请教,最近所做样品不稳定,不知是何原因

各位,偶们近日在做鼠药的检测,初时很顺利,质谱与液相条件一下搞定。但重复进样同一样品溶液后,样品峰明显降低。于是换不同的色谱柱和不同的流动相系统,都不稳定,表现如下:1.保留时间渐长;2.峰值忽高忽低,或持续降低。于是,用标准溶液校正质谱仪,没有问题,正常。而且,每天做的第一针,峰值较一致,故认为样品也较稳定。
    现又用以前建立的一个方法,也出现了峰高及保留时间不稳的现象,但此方法连续进样7-8次比较稳定,后有所变化,但接下来的7-8针也比较稳定,只是和上一段不同。
    不知是何原因,请各位指教!
    急!
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masscharge[使用道具]
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2
 

液相方法

液相洗脱方法是等度还是梯度方法?
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troy.tper.lee[使用道具]
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3
 
你所遇到问题的基本情况我不太知道,只能根据自已的估测理解一下了:
(1)体系的平衡问题:不论是液相系统,还是质谱系统,平衡都是很重要的。可能一般情况需要时间比较少,但特殊药物或梯度等可能要稍微平衡久一些。
(2)样品溶剂太脏或有抑制信号的物质:我估计这个的可能性很大,因为你每天的信号从早到晚是衰减的,很有可能是进样等引入了抑制信号的物质,等每天晚上冲洗好之后信号又恢复了。请将脏的物质或试剂切出质谱仪或是前处理掉。
(3)如果你使用的是梯度:梯度是不是不太适合,样品作久了有累积效应等。这样的话适当的增加平衡或高有机相冲洗时间。另外,建议使用甲酸/甲酸铵或乙酸/乙酸铵缓冲系统,可能会稳定些。
(4)建议使用内标法,即使信号下降也不一定引响信号。
(5)如果内标法信号下降也不影响实验结果或线性等的话,可以直接进行检测试验。前一阵我做一个检测,色谱峰总漂,但不影响检测,方法确证特别好,后来也就完成了测试。


[ 本帖最后由 troy.tper.lee 于 2008-7-23 13:57 编辑 ]
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  • miracle   2008-9-1 09:26  专家分  +10   楼主的热心助人的精神很值得大家学习! ...
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j-1982[使用道具]
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楼上想的太周到了!
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michaelsun111[使用道具]
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顺便学习,呵呵,找沙发坐
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jenny0121[使用道具]
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多谢!
不知版主说的“色谱峰总漂”是什么意思?保留时间有变化吗?
现在我遇到的问题又有了新的发展,峰强度基本不变,但保留时间还是变化。如,昨天做2.9min,今天就可能是2.7,但一天之内是稳定的。现在用的是等度,但梯度也用过,不理想,一样。
流动相也加过酸,用过缓冲溶液,没有改善。
很痛苦,不出活啊!
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vvyouttjean(user00)[使用道具]
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