蛋白质与蛋白组学

关于发电泳图，建议楼主先将图片用软件如photoshop或ACDSee等转换为jpg的格式，裁剪一下，用附件形式直接显示，同时文件也很小。这样大家一眼就可以看到，不必下载了，有利于高手路过时帮你解决问题哦。
我把你的图变了一下，看看是不是方便许多？

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其实哦这个图，洗脱组分，稍微稀释一下，纯度就会好看很多，象楼主那么大的上样量，就算是90%纯的蛋白样品跑出来也是有杂带的。
看楼主的杂带是大小分子量均匀分布，我感觉是纯化时残留的菌体的杂蛋白可能性比较大，不象是目的蛋白降解或者是目的蛋白中断表达的产物。
在清洗液（binding buffer）里加500mM NaCL和1% Triton-X100吧，多洗一些柱体积（15-20倍）

这次我在平衡缓冲液中添加了1%Triton，2mM PMSF ,并采用了不同浓度的还原谷胱甘肽去做阶段洗脱，发现在我的目的蛋白大部分在流穿和wash中，小部分用2mM的GSH就能洗脱下来了。请大家帮我分下下面这个图，谢谢！
lane 1，marker，
lane 2，3，4，5，6，7 : 是分别收集的10ml wash,
lane 8,9,10,11，12: 2mM GSH,4mM GSH,6mM GSH,8mM GSH,10mM GSH洗脱

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这次的图和上次有很多不一样嘛
1，上次好象没有GST单体纯化出来，这次明显有，所以你的8号泳道是明显双带
很奇怪你上次的原始样品貌似也是有疑似GST单体带存在的，怎么就没纯化出来
2，洗脱梯度，应该从0.5mM开始

你好，请问一下，这个梯度洗脱还需要在层析柜里进行旋转10min什么的吗？还是像镍柱一样直接就如洗脱液后直接流出就可以了啊？