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标题:【求助】GST融合蛋白诱导

jujuba[使用道具]
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发表于 2014-1-9 11:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼主十之八九表达的是一个膜蛋白
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zsxan1990[使用道具]
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发表于 2014-1-9 11:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不表达原因挺复杂的，我们实验室貌似经常会遇到这种事。
检查一下质粒启动子、ATG等有没有问题，要不换个载体，换个菌株。祝好运！

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支持！载体构建时有没有注意移码的问题，表达时的稀有密码子问题
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abc816[使用道具]
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发表于 2014-1-9 11:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不表达的原因实在有太多种了
可能很多人会忽视酶切位点的影响。
就拿pGEX-4T-2来说，如果用了ECOR I SAL I XHO I这3个酶切位点作为5`的位点，如果不删补碱基，那表达的时候序列就会移码突变，导致无法表达，或者错误表达。
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