【求助】SDS-PAGE小分子条带不见了

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标题:【求助】SDS-PAGE小分子条带不见了

babybabe[使用道具]
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发表于 2014-1-19 13:25 资料个人空间短消息加为好友

小中大

如图12%的分离胶，4%浓缩胶。marker本应该有7条，最小的是18.4和14.4KD（失踪的就是这两个大小的带，样品中小于这个值的蛋白也看不见）。可是每次都只能看到5条。图中最下面一条线是溴酚蓝的位置，没有跑出去。
请问是什么原因？

附件

2014-1-19 13:25

80071712.jpg (29.31 KB)

babybabe[使用道具]
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发表于 2014-1-19 13:26 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这是我的电泳图

附件

2014-1-19 13:26

17446563.jpg (42.81 KB)

hustwb[使用道具]
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发表于 2014-1-19 13:26 资料个人空间短消息加为好友

小中大

会不会已经跑出胶了，你可以尝试让溴酚蓝只跑到3/4胶面处就停止电泳，然后看看能否看到

cocacola[使用道具]
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发表于 2014-1-19 13:27 资料个人空间短消息加为好友

小中大

从图上看显然小分子蛋白被压到了和溴酚蓝前沿相同的位置，如果没有跑出去的话就是胶浓度不对，建议更换试剂

9900[使用道具]
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发表于 2014-1-19 13:27 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 cocacola 于 2014-1-19 13:27 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
从图上看显然小分子蛋白被压到了和溴酚蓝前沿相同的位置，如果没有跑出去的话就是胶浓度不对，建议更换试剂

同意。是胶的浓度不对了。检查一下丙烯酰胺的配制，干脆配点新的。

sunnyB[使用道具]
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发表于 2014-1-19 13:27 资料个人空间短消息加为好友

小中大

单一浓度的胶的分辨率不高，特别是对小分子量的蛋白，梯度胶的分辨率就可以提升，建议用4－20％梯度胶试试。

131415[使用道具]
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发表于 2014-1-19 13:28 资料个人空间短消息加为好友

小中大

15%分离胶试一下吧！
我也用的是fermentas的这个marker！

veiwu[使用道具]
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