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就我的了解和经验，和紫菁战友讨论一下，期望能共同进步。
1.蛋白个体差异的确很大，可能层析的过程研究的相对较多，而层析前的处理方法关注的比较不够，应该说包涵体洗涤和溶解对最后的层析收率影响是很大的，甚至超过层析条件的影响。
2.至于加热溶解的方法，可以水浴锅加热，然后使用小的搅拌装置就行，也可以用水浴摇床或是可空气加热的摇床。
3.尿素溶液可以用盐酸调到5.0~6.0的pH后溶解包涵体试试，也许有用。当然，这的确是和蛋白性质有关。
4.尿素高温和长时间中温会分解，使溶液浓度降低，而且生成的氰酸跟还会不可逆的修饰蛋白，有时会导致失活，故即便提高溶解温度，也不要高于30度。30度以内应该是安全的。
5.如果提高温度有效果的话，便忘了层析全过程都要保持温度，防止蛋白沉在柱子里。
祝好运！
