小中大提质粒的事情终于告一段落,原来是感受态转化效率低,在这里也可以给后来人做个借鉴:如果自己做的感受态一直转不进去就不要转了。我是直接买的takarar感受态,效率非常高,质粒也都提得差不多了。
后续又有问题出现:老板让拿几个提出来的AD先测序,其中一个测序结果出来以后对插入片段进行了blast比对,发现插入的1.5K的片段不能编码蛋白,也就是说可能是内含子吗?文库是买来的,按理说cDNA文库中不应该有非编码蛋白的的序列啊,我对分子生物学不是特别懂,请高手指教~
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可能是mRNA的非编码区域
我也遇到过的