小中大现在碰到了非常头疼的事情。
SDS-PAGE电泳时，纯化好后的蛋白没有经过透析直接上样，结果还没跑完浓缩胶，就见溴酚蓝参差不齐，东倒西歪，另外，浓缩不成一条直线。简直可以用大花脸来形容，图我就不上了，情况就是这样的。
我唯一能确定的是所制的浓缩胶是没有问题的，其他的线索就是：我的蛋白样品中含有PMSF（用乙醇溶解），较多的氯化钠，一定量的2-ME以及NP-40，说到NP-40，我昨晚纯化的时候，发现树脂结块现象，我估计是NP-40捣的鬼。
做了一个通宵的实验，身心俱疲啊！如果是蛋白电泳正常跑完后，发现纯化结果不好，我也就算了，可以重新摸索纯化条件，可现在连蛋白电泳都不能正常去跑，实在让我失落啊。请战友们指点迷津！
回答上述问题: 电泳跑不出来,条带发生扭曲,是因为样品中盐浓度过高,建议脱盐后再跑电泳.
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我已经停止使用PMSF和NP-40了，另外氯化钠浓度不变，2-ME浓度适当减少。具体细节可参见上楼。“建议脱盐后再跑电泳.”想了想，还得买脱盐柱，所以就没实施战友的建议~：）））
问了其他一些实验室的人，他们说咪唑对蛋白电泳的影响应该不大，不然就不会透析前就去跑蛋白电泳了。
