【求助】蛋白表达,未诱导和诱导组之间没差异? - 经验共享

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标题:【求助】蛋白表达,未诱导和诱导组之间没差异?

zsxan1990[使用道具]
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发表于 2014-3-1 10:59 资料个人空间短消息加为好友

小中大

转速太高了吧？

ritou1985[使用道具]
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发表于 2014-3-1 11:00 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你确信你的序列和载体都没有问题吗?首先要保证这个.其次,可以多筛选几个转化表达宿主的菌株,一起诱导筛选看看;如果还是没有表达,再试着换下别的表达宿主.
如果有表达,OD,转速啊什么的可能都不是问题,关键地方一定要保证正确.
祝你好运!

大海啊故乡[使用道具]
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发表于 2014-3-1 11:00 资料个人空间短消息加为好友

小中大

把诱导前的OD提高到了1.5左右

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我的天，到了这个OD的菌太老了。一般0.5到0.8就合适的了，116678004战友说的没错，0.6比较合适。
如果想多收集菌体的话可以多取菌液离心后合并，不用提高OD吧。

one[使用道具]
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发表于 2014-3-1 11:01 资料个人空间短消息加为好友

小中大

顶！我现在也遇到相识的问题，就是蛋白补表达，郁闷中，现在也找不到原因，还希望高手继续指点！

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