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标题:【求助】超声提取时产生大量的白色泡沫,是何原因?

vivian4123[使用道具]
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超的是什么?
菌液的话,不该这样,功率肯定大了
如果是组织样本,应该想用“绞肉机”彻底打碎样本,或者做死的研磨,然后超声。
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TAT[使用道具]
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NP-40是不是去糖基化的物质?它是起泡剂啊?把它放在裂解液里一起超声是不是可以顺便去除糖基?
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changlhsyo[使用道具]
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超蛋白的时候产生大量泡沫是因为打空了,那样就等于没有超声好
应该将超声头完全侵入蛋白裂解液里,就不会出现充分
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cj_mondy[使用道具]
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今天测了一下浓度,才有100ug/ml
为什么会这么低呢。我用的是TCA丙酮法,用丙酮洗了一次,乙醇/乙醚=1:1的洗了两次,然后加裂解液。加裂解液前沉淀很多,然后按照10mg加200ul裂解液加的,没想到浓度这么低。是因为产生气泡的原因吗?
另外我比较倒霉,冰箱坏掉了,等过完周末,箱内温度到了16度。大家分析分析是什么原因?
谢谢
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gmjghh[使用道具]
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请问楼上,Lysis是什么成分?
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cj_mondy[使用道具]
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回复 #15 gmjghh 的帖子

尿素  7M
硫脲  2M
CHAPS  4%
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hold住[使用道具]
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CHAPS肯定会有泡沫产生,我之前也是用裂解液直接当超声缓冲液了,结果发现探头位置合适,温度也够低,还是会产生泡沫,后来直接用PBS加蛋白酶抑制剂超声,完了再加入裂解液各种成分,效果有改善。
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redbutterfly[使用道具]
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请问楼上,你先用的PBS,然后再加裂解液各成分,那PBS用不用去除啊?
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kuaizige[使用道具]
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不去除,没发现有什么影响
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cj_mondy[使用道具]
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