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标题:【求助】做WB时候怎样才能节省一抗与二抗，又不影响结果？

wiwi[使用道具]
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发表于 2014-3-16 23:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我用蜡皿很省抗体
蜡皿做法很简单，拿一个玻璃瓶皿，里面放一块蜡，加热，然后冷却就好了。
以后把要做的膜放在上面，因为有表面张力的作用，加的抗体都不会留到其他地方去，只要0.5-1ml就足够了，而且基本可以回收。
如果过夜的话记得把蜡皿再放入一个湿盒里，这样放冰箱就不会被蒸发了
但是我不知道这样和放摇床里摇有没有区别。
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birdfish[使用道具]
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发表于 2014-3-16 23:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼上的,这方法虽然是我从别的实验室学来的,但是实践结果效果有区别的,因为膜 两头翘起来,这样两端可能不出现条带,而且抗体浓度要求更高浓度,不合算的.
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nikun230[使用道具]
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发表于 2014-3-16 23:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我们实验室的做法 绝对超省抗体 而且效果很好
1.准备一张玻璃板，保鲜膜包裹，粘好，让其一个面保持平整
2.抗体稀释到250ul体积左右，用多大比例的自己算好了，我一次只用2ul
3.稀释好的抗体滴在保鲜膜上，NC膜正面朝下，覆盖在抗体上，注意不要有气泡，而且整个膜都要接触到抗体
4.放在湿盒里孵育， 不会干，我们都孵育过夜，没问题
1 2 抗都按这种方法做 是不是很省抗体呢？
关键是 抗体可以现用现配，每次都用新鲜的，效果也很好
希望大家实验顺利 顺利毕业！ 我也是！
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