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以前BL21能表达,就没必要换到Rosetta中。同意以上多位战友的意见,用新鲜转化的菌!
大量生产的话可以用BL21 DE3 Star,一般来说表达量要高很多。当然载体也是一个因素,但同样的载体一般来说这个菌株的表达量更高. Invitrogen 的说明书上说:
The BL21 (DE3) Star cells contain a mutation in the gene encoding RNaseE (rne131), which is one of the primary enzymes involved with mRNA degradation in E. coli. This mutation significantly improves the stability of mRNA transcripts and thus increases protein production.
mRNA在宿主中的稳定性也是影响表达量的一个因素,这个菌株就是通过提高这一点达到的。