气相色谱

1、最近在做溶剂残留的方法学验证，里面的残留溶剂是甲醇和乙酸乙酯，在做乙酸乙酯的检测限的时候，峰形有点拖尾，对称因子达不到0.8，定量限是可以的，请问各位老师有没有遇到这种情况，检测限的对称因子不合格对注册没有影响吧。
2、我们在做回收率的时候用的是内标法，请老师看看我的方法有没有问题，产品中甲醇含量范围30~500PPM左右，乙酸乙酯的检测不到。我按照50%、10%、5%做的回收率，方法如下：
内标溶液：称取异丙醇1.0605g，于500ml容量瓶中，用DMF定溶至刻度。

溶液1--------准确称取甲醇0.3000g、乙酸乙酯0.5000g于一100ml容量瓶中，用内标物溶液稀释至刻度100%）。
溶液2 -------准确移取25.0ml溶液1于50ml容量瓶中，用内标物溶液稀释至刻度（50%）。
溶液3------准确移取5ml溶液1于50ml容量瓶中，用内标物溶液稀释至刻度（10%）。
溶液4 ------准确移取2.5ml溶液1于50ml容量瓶中，用内标物溶液稀释至刻度（5%）。
标准溶液------准确称取甲醇0.1826g、乙酸乙酯0.1900g、异丙醇0.2155g于一100ml容量瓶中，用DMF稀释至刻度，备用。
取配制好的标准溶液进样，平行测定三次，记录残留溶剂及内标物的质量和峰面积，根据计算公式计算各残留溶剂的校正因子：
fi=As*mi/Ai*ms
式中：
fi-组分i的校正因子
As-组分i所对应的内标物S的峰面积
Ai-组分i的峰面积
ms-组分i所对应的内标物S的质量
mi-组分i的质量

将配制好的溶液1到溶液4分别进样检测，每个溶液进样三次，计算各溶液的实测纯度,。由溶液的稀释过程可以计算溶液的理论纯度，将测定值与理论值相比可以计算回收率。

上述方法的溶液范围不知道设定的是否符合要求，我们仪器的定量限，甲醇的为23PPM，乙酸乙酯为20PPM，请老师给与指导，谢谢。

[ 本帖最后由 zhangyandong4 于 2010-8-26 07:40 编辑 ]

检出限定义是三倍噪声水平，对称因子达不到要求可能跟噪声波动也有关系，可以接受。

其实直接配制的样品是没有必要做回收率实验的，即使做，一般是选择待测浓度的120%，100%，80%。

我们药品中溶剂残留的量大概也就是限度的5%~50%，所以我想把回收率做成这样的，其实这样我心里也没有底。

[ 本帖最后由 zhangyandong4 于 2010-8-25 08:17 编辑 ]

老师被你这么一说，有很多地方我也见到说不需要做准确度的，不过我们的两个残留溶剂里，有一个含量还是很高的，而且省局要求我们尽量做出来，很无奈啊。

[ 本帖最后由 zhangyandong4 于 2010-8-25 08:19 编辑 ]

含量高的测定时可通过稀释达到通常的测量浓度。你的溶剂残留浓度是5%~50%？那方法就以5%为待测浓度，标准溶液中甲醇的浓度配制也应接近5%，回收率所测的浓度应是5%*120%，5%*100%，5%*80%

其他超过5%的待测液，稀释到约5%再用此方法定量。因为你这是内标法，不是标准曲线法，待测物浓度应与标品接近，大范围浓度变化的样品用此方法不宜直接进样定量。

说先谢谢老师的回复，让我感觉到有点明白了，不过我们做溶剂残留的方法验证，如果以5%为基准做回收率的话，那我的线性(1%-120%)，还有的精密度(1%-50%)不受影响吗？

期待老师的回复

做回收率的时候要先做线性和范围，线性至少要做到定量限，而回收率所取用的浓度范围要包含在线性和范围内，一般都是小的一个，标准一个，大的一个。具体还要看你样品的含量了。