蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【讨论专区】蛋白质组学研究方法

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标题:【讨论专区】蛋白质组学研究方法

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发表于 2014-4-2 22:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
A Guide to Protein Isolation(3.65M),需要者见：
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=86&id=174385&tpg=1&ppg=1&sty=1')
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兔唇[使用道具]
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发表于 2014-4-2 22:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你的体会用双杂交找新的相互作用蛋白风险多大？周期多长？
我需要找一个膜表面蛋白的配体，但我们实验室是搞基因的，蛋白做的少，能否与你们合作。你们在上海吗？
不知谁知道上海谁做的好？因为我们想短期内得到这个配体。
不知在双杂交以前，配体和受体是如何找到的？
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发表于 2014-4-2 22:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我想做对肠道平滑肌细胞内钙调蛋白的检测，请问有没有对检测细胞内钙调蛋白有经验的同志，指点一下迷津，非常感谢!!
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发表于 2014-4-2 22:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你的体会用双杂交找新的相互作用蛋白风险多大？周期多长？
我需要找一个膜表面蛋白的配体，但我们实验室是搞基因的，蛋白做的少，能否与你们合作。你们在上海吗？
不知谁知道上海谁做的好？因为我们想短期内得到这个配体。
不知在双杂交以前，配体和受体是如何找到的？
......

=============================================================================================

　　不好意思!我很久没来。
　　我不在上海，而且相距很远，帮不到你了！
　　不知你指的风险是什么？是假阳性么？如果是的话，那么风险很大。
　　用酵母双杂交假阳性较高，但如果用多个报告基因，就可以弥补之。酵母双杂交的周期大概１个月！算不算长呀？
　　你首先要用文库来筛呀！有文库么？
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mingming0638[使用道具]
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发表于 2014-4-2 22:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

......

　　我不在上海，而且相距很远，帮不到你了！
　　不知你指的风险是什么？是假阳性么？如果是的话，那么风险很大。
　　用酵母双杂交假阳性较高，但如果用多个报告基因，就可以弥补之。酵母双杂交的周期大概１个月！算不算长呀？
　　你首先要用文库来筛呀！有文库么？
　　有事在联系!
不好意思,刚才发完帖子才发现用的是别人的号!见谅!!!
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发表于 2014-4-2 22:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问各位大侠如何从组织中提取蛋白,多谢!
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发表于 2014-4-2 22:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问楼主和各位专家：怎样从培养细胞提取多肽（与蛋白质提取有和不同）？2-D电泳能否分离这种小分子蛋白质多肽？
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feima+[使用道具]
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发表于 2014-4-2 22:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

1。蛋白质组学研究我个人经验认为是一个多种蛋白方法的综合。例如可将HPLC, DEAE离子交换层析等技术融合。
2. 2D电泳的关键是标本的处理。标本的质量直接影响2D的成功。
3.2D仅仅是一个初筛技术。需要进一步进行差异蛋白的功能分析，包括免疫，结构分析以及应用。
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queen[使用道具]
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发表于 2014-4-2 22:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问各位大侠如何从组织中提取蛋白,多谢!
Re: 可以用玻璃匀浆器匀浆，先在匀浆器里加入适量的蛋白裂解液如三去污等，将组织剪成小碎块，至于匀浆器中匀浆即可，整个过程应在冰浴的条件下进行，动作要快一些，后续步骤同细胞裂解。
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idoww[使用道具]
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发表于 2014-4-2 22:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问,有谁知道RasMal2.6怎么用?对蛋白质晶体结构真的搞不清楚
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