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标题:【求助】膜蛋白提取办法

梦幻苹果[使用道具]
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发表于 2014-4-5 11:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】膜蛋白提取办法


我做膜蛋白提取一段时间，结果硬是出不来，文献上说，500g离心5min,取上清，再100000g离心，弃上清，下层沉淀用裂解液再悬浮用来做膜蛋白用，但我始终没出结果，请问大家是何原因，我的是小肠组织。有没有更好的办法啊
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wu11998866[使用道具]
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发表于 2014-4-5 11:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

是这样的,关于膜蛋白的提取,如果想单纯提取膜蛋白,而不是细胞总蛋白,用平常的RIPA是可以的,但是效果不理想,同时需要高速离心机,这种设备很多实验室是很难达到的
所以,最简单的是购买试剂盒,低速离心就OK,价格5,600百元吧,但是结果理想.
祝顺利
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jiushikeshui371[使用道具]
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发表于 2014-4-5 11:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

在酵母中表达人的膜蛋白，有什么好的提取方法吗？
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panda王[使用道具]
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发表于 2014-4-5 11:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也是做膜蛋白的提取，用的是南京凯基的膜蛋白提取试剂盒，但制备出来的样品跑蛋白电泳时什么也没有，不知道什么原因？
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greenbee[使用道具]
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发表于 2014-4-5 11:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

个人感觉膜蛋白提取Kit都有点out of style.不妨自己提取,我提取的膜蛋白的质量非常好,膜蛋白提取的关键是超速后membrane pellet的Na2CO3洗涤过程,要洗涤干净.
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panda王[使用道具]
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发表于 2014-4-5 11:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

自己怎么提取啊？能否告知一下提取程序？非常需要！谢谢了！
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发表于 2017-8-16 18:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #5 greenbee 的帖子

请问自己怎么提取呢？有protocol吗
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