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标题:【求助】为什么我的胶怎么也凝固不了！

u76mp[使用道具]
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发表于 2014-4-10 15:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】为什么我的胶怎么也凝固不了！


各位大侠，我现在有个奇怪的事情向大家请教，最近我做WB的胶不知道怎么搞的，怎么弄也凝不了。4度过夜也不行，所有的东西都重新配置了（除了TEMED,这个一直放冰箱4度的，有1 年多了），还是凝不助，一点都没有凝固。我郁闷死，希望大家帮我分析一下，谢谢！
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ROSE李[使用道具]
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发表于 2014-4-10 15:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

检查一下APS浓度什么的，我有一次也是弄错了APS浓度就是不凝！APS好像是10%吧
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bamboo16[使用道具]
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发表于 2014-4-10 15:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

放到37度，试试。
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orangecake[使用道具]
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发表于 2014-4-10 15:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
刚做过一回。也曾遇到过你的类似情况。换掉APS和TEMED，另外，重新配制Acr-Bis后一切ok
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wawa[使用道具]
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发表于 2014-4-10 15:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

AP的量是最重要的了,我刚开始做的时候也好长时间不凝,把AP的量加倍就好了(20%),但是AP一定要现用现配.分离胶聚半个小时就可以了,很容易聚的,浓缩胶时间要长一些,因为浓缩胶有一个"老化"的过程,大概至少要45分钟吧,加样孔也要用电极缓冲液清洗用滤纸吸干,因为浓缩胶的Acr-Bis的浓度相对分离胶要低,所以浓缩胶相对比较脆和粘
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tangxin_80[使用道具]
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发表于 2014-4-10 15:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

实验室之前 曾经遇到过这种情况，分析了所有东西之后，觉得还是aps和temed的问题， 重新买了之后，一切ok!
你的情况估计是这两个某个失效了，买新的吧，应该可以解决。
APS 一周重新配一次就可以，现用现配太麻烦，好像不是太必要。
如果这些溶液没问题， 室温下就可以很容易凝固，实际上肉眼看10分钟左右就凝了，但是还是要多等一下，让胶 凝固的更彻底。30分钟够了。
祝好运！
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发表于 2014-4-10 15:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我觉得你最有可能原因有两个:
一是你的30%Acr-Bis母液配错了,很有可能是双丙没有加.
二是你的TEMED过期了,APS浓度稀点或时间长点都不会有出现不凝的情况.
你还可以做个试验,把你的胶放到50烘箱里去,看凝不凝,如果凝的很硬而且脆就是没有加双丙,如果软而有点韧性,那是正常的.
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u76mp[使用道具]
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发表于 2014-4-10 15:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢大家的提议。TEMED一般能放多久啊？我们实验室是师姐留下来的，一直在4度。我曾经把胶放在高压锅盖上它都没有凝固，依然象水一样，AP的浓度也没有错，而且加倍加量也试过，依然不行，其他的成分我都仔细的重新配置了2遍，只有TEMED没有变？听说这个人家可以用几年的。而且我就在头一天凝固的很好，下午冰箱停电2小时以后就什么都不行了，我想2小时应该不会影响多大吧，我做WB快有1年了，从来没有遇到这样的问题，真是很郁闷，问题还是没有找到。
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redbutterfly[使用道具]
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发表于 2014-4-10 15:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
TEMED放4度没问题的,我同实验室的也有胶凝不了的情况,后来发现是APS的问题.一般要放4度,而且一周配一次.重要的是浓度要对.另外,我们实验室也出现过整瓶APS潮解,再配新的当然也用不成.____________借别人的试下._____现在这样的天气,也就二十分钟肯定凝了.
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发表于 2014-4-10 15:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

与其在这猜测，还不如把TEMED换掉，时间是最为宝贵的
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