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标题:【求助】为什么我的胶怎么也凝固不了！

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发表于 2014-4-10 15:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我曾经也遇到过相似的问题。结果发现是AP潮解了，重新配制就OK了。个人感受TEMED可以使用很长时间的，首先不应该考虑是TEMED的问题。
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33号[使用道具]
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发表于 2014-4-10 15:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可能的情况有：
1.TEMED基本应该是不需要怀疑的；
2.APS溶液需要现用现配，且前提条件是你的原包装没有整体潮解，这个东西总愿意潮解，很不听话的：)
3.必要时可以加大APS的使用浓度以加快胶的凝结速度，不过这种做法只在冬天时需要；
4.另外我想提醒一下楼主，SDS-PAGE是高温时凝的快，低温时凝的慢，或者是不凝，我们做胶时为防止配制好的buffer凝结，都是在冰上配制混合液的，所以如果你的胶不凝，那你放到4度就更不会凝了，呵呵
这个问题应该是很容易解决的，不用上火，我们实验室去年也发生了例似情况，很快就解决了，放心吧！
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any333[使用道具]
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发表于 2014-4-10 15:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

换瓶新的APS
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发表于 2014-4-10 15:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

TEMED 失效会发黄
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ii077345[使用道具]
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发表于 2014-4-10 15:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

建议1：直接挑点APS固体加入胶液中，立即搅匀
2、待胶各配方加完混匀，上层加异丁醇封胶后，静置，不要去动它，待一定时间后，用肉眼观察胶有否分层？
3、TEMED一般是不会变质的。
4、向周围实验室要点APS及TEMED，排除一下你的这两个试剂的问题。
GOOD LUCK!
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发表于 2014-4-10 15:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果所有试剂都重新配过，依然无济于事的话，那么可以肯定的是你的过硫酸铵固体变质了，需要重新买新的，买回后小份分装密封，最好低温保存，每2周重新取一份，重新配制，一定可以解决这个问题！
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plaa[使用道具]
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发表于 2014-4-10 15:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

就是APS跟TEMED的问题的!!!
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mercedes[使用道具]
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发表于 2014-4-10 15:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你好~
如果原因实在找不到，直接买公司的一些现成的试剂盒，广州达晖生物卖的凝胶试剂盒质量好且便宜，比自己配制还要省钱省时间。37636952-14
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yes4[使用道具]
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发表于 2014-4-10 15:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

APS出问题的情况比较多。好用的APS加水能听到轻微的爆鸣音，如果静静的，可能就是不能用了。
凝胶凝结温度不要低于20°，否则影响凝结
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one[使用道具]
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发表于 2014-4-10 15:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我以前也遇到同样的问题,一直不知道怎么回事,aps我也现配的,TEMED我又问同事借用的,可是还是不行,到最后我又重配了30%的丙烯酰胺,结果就出来了,交联是不是有问题啊,
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