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ECL液带着也没什么大事儿(很不负责任的说…… -_-!),有时懒得弄就让它那么干了,过几天再strip,杂Actin也能出,效果不很好就是了
strip完TBST洗后该不影响丽春红染色,没了可能就是蛋白没了……因为没用过那个srtip液,所以不好说,要不就再用快绿染个?要是都不出就是没有了……对了,还可以直接让膜半干,有蛋白的话蛋白条带半透明,而没蛋白的部分是白色的,应该比叫直观,要是这几种方法都不行那就是没蛋白了……
很多strip的配方和条件感觉都比较苛刻,比如我们用的(β-巯基乙醇 800ul,SDS 2g,tris 0.765g,去离子水定容至100ml,PH调至6.7)推荐是70度1h,可是我们60度15min就感觉预染Marker变淡了,不知道是不是反复使用的缘故,说到这儿想起来,要是你的蛋白有跑预染Marker的话,看Marker就知道是不是被Strip没了
显色液貌似有快显 慢显两种,我们自己配的快显太快了,后来干脆稀释上2-4倍使用,控制显影时间在15-30s,当然用一段时间后显影时间会有延长,后来组里买了台洗片机,就只能控制曝光时间了……