小中大【求助】怎么在堆积胶里就分离了呢?
这几天跑电泳出现了蛋白和MARKER在堆积胶不堆积,就有点分离了,到堆积胶和分离胶交接的地方也没有堆积成一条线,这是什么原因呢,同样地样品我让师姐帮我跑了电泳(从做胶和仪器以及电泳液都是师姐的),没有出现在堆积胶就分离出条带的现象,说明不是上样缓冲液的问题吧,我自己重新检测了各个试剂的PH值,也没有问题,又分别换了师姐的丙烯酰胺、Tris(又分别做了两次),还是一样的问题,过硫酸氨是新买的分装好现用现配的,不知道到底是哪里出了问题???
而且样品的溴酚蓝总是在MARKER的倒数第二条的位置(17kd),以前都是和最下面一条MARKER(11kd)在一条线上,这是为什么呢???希望大家给帮帮忙吧!!!谢谢了
要感谢cake,我看了你给我的cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/thread/9443451'),好像和我出现的问题不是很一样,我的是连MARKER都在堆积胶里分开条带了(因为堆积胶1CM,所以只能看见隐约的条带),到了堆积胶和分离胶交接的地方也没有压成一条线,就直接这么分开着跑下去了,不知道是什么原因啊?Sad
请大家赐教!!!谢谢!!!