蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【分享帖】PNAS上一篇关于多拷贝卡那霉素抗性基因与高...

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 17  2/2 ‹‹12
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【分享帖】PNAS上一篇关于多拷贝卡那霉素抗性基因与高...

S6044[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75117
精华 0
积分 559
帖子 797
信誉分 100
可用分 4821
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
11

发表于 2014-4-15 18:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

结果
3，Km基因拷贝数与Km抗性的关系
做微生物发酵的学者都知道，某种抗生素的高产菌株往往是这种抗生素的高抗性菌株。经常用高浓度抗生素来筛选高产菌株。这是因为抗生素基因簇中含有抗性基因，微生物在产生抗生素同时也产生了抗性，那么高产抗生素的菌株抗性自然也应该高。
图A中分别向培养基中加入不同浓度的抗生素，浓度高的2，S酶切后杂交得到的Km拷贝数更高。
图B中在不加卡那霉素的培养基中将高产菌株传代2代，可看到10Kb的条带越来越浅，表明拷贝数降低。
图C中在不加卡那霉素的培养基中将高产菌株传代2代，S酶切后杂交原点的高拷贝的条带更少，而相对的低拷贝条带加深，表明拷贝数降低。


查看积分策略说明
附件
2014-4-15 18:09
87728488.jpg (33.69 KB)
 
顶部
S6044[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75117
精华 0
积分 559
帖子 797
信誉分 100
可用分 4821
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
12

发表于 2014-4-15 18:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

同时，发酵结果也表明，卡那霉素的产量也依赖其基因簇的拷贝数，不言而喻。


查看积分策略说明
附件
2014-4-15 18:10
69573737.jpg (44.9 KB)
 
顶部
S6044[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75117
精华 0
积分 559
帖子 797
信誉分 100
可用分 4821
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
13

发表于 2014-4-15 18:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
累死了，终于开始讨论了
首先是我前面讲到的，高抗性和高产量的必然关系，不说了。
其次文章总结了三种不受自身抗生素毒害的原理：
1，细胞内的对抗生素的修饰
2，修饰抗生素的靶分子
3，分泌功能


查看积分策略说明
附件
2014-4-15 18:10
47534745.jpg (50.36 KB)
 
顶部
S6044[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75117
精华 0
积分 559
帖子 797
信誉分 100
可用分 4821
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
14

发表于 2014-4-15 18:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

那么，提出最关键的重组的模型，还是非常有依据和有创意的。复制差移动的过程中，重组位点RsA和B靠近，连接，RsC和D再靠近，连接。循环n次。
请看图


查看积分策略说明
附件
2014-4-15 18:11
46067821.jpg (27.13 KB)
 
顶部
S6044[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75117
精华 0
积分 559
帖子 797
信誉分 100
可用分 4821
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
15

发表于 2014-4-15 18:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

最后也就是最经典的就是这句话——


查看积分策略说明
附件
2014-4-15 18:11
64295167.jpg (41.06 KB)
 
顶部
S6044[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 75117
精华 0
积分 559
帖子 797
信誉分 100
可用分 4821
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态 离线
16

发表于 2014-4-15 18:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这篇文章的好处，在前文我已经提过了。对于没做过分子生物学的人来说，很多实验方法和词汇会难理解，比如基因簇，Southernblot，染色体步移等等。但这些只是死的知识，看书就可知道，做一次就懂了。最重要的是idea，往往最羡慕的是人家老外用几个easy的实验说明了一个原理。
希望我们也能将自己正在做的故事画上完美的句号，再讲给大家听。
谢谢关注！
顶部
NBA[使用道具]
五级
Rank: 5Rank: 5


UID 75229
精华 6
积分 2497
帖子 4006
信誉分 114
可用分 20946
专家分 70
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
17

发表于 2014-4-15 18:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

好贴, 确实精彩，谢谢～～～
但有一点
并且一发表就成为NCBI的pubmud上的免费文章，可见其基础研究的重要性。
这个说法不太正确,所有PNAS的文章都是免费文章,并且一发表就成为NCBI的pubmud上的免费文章，呵呵
顶部
 17  2/2 ‹‹12