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标题:【求助】一抗保存问题

eric930[使用道具]
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一抗有必要加防腐剂,加硫柳汞也很好,也需要分装,一旦污染就不能用了
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可以使用牛莎PC-300抑菌剂,如果浓缩的方案,建议使用牛莎PC-950
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可以使用牛莎PC-300抑菌剂,如果浓缩的方案,建议使用牛莎PC-950
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chenzhen2016[使用道具]
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1.分装抗体时,首先要确保分装过程在无菌条件下进行,以避免细菌污染。以下是一般的分装步骤:

准备干净的微量离心管或冻存管,并标记好抗体名称、批号和日期。
根据需要的浓度计算所需的抗体体积。注意,避免频繁冻融抗体,最好根据实验需求分装适量的抗体。
使用无菌的移液器和滤器尖端,将抗体从原瓶中吸取,并轻轻滴入预先准备好的离心管或冻存管中。
分装后,尽量迅速密封离心管或冻存管,并存放在适当的温度和条件下,如-20°C或-80°C。

2.二甲亚砜(Dimethyl Sulfoxide,DMSO)是一种常用的溶剂,在某些情况下也可用作防腐剂。但需要注意的是,对于抗体稀释液,一般不建议直接添加二甲亚砜作为防腐剂。

抗体的稀释液通常是一种含有蛋白质稳定剂(如牛血清蛋白、酪蛋白、明胶等)的缓冲液,用于稀释一抗和提供适当的浓度进行实验。这些稳定剂已经提供了一定的防腐功能。

如果你的实验需要长期保存一抗稀释液,可以考虑将其分装成小份,并在-20°C或更低的温度下存储,以延长其有效期。在分装过程中,确保使用无菌技术,并且避免频繁冻融。

总之,对于抗体稀释液,不建议直接加入二甲亚砜作为防腐剂。而是根据抗体稀释液的成分和使用要求,选择适当的稳定剂和储存条件来保持抗体的稳定性和活性。如果有具体的抗体保存要求,最好参考抗体供应商的建议或相关文献资料。
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chenzhen2016[使用道具]
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将买来的抗体进行分装时,需要遵循一些基本的操作规范,以确保其保存和使用的质量。以下是分装抗体的一些建议步骤:

1. 无菌条件下操作:在无菌条件下进行操作,以防止抗体被细菌或其他微生物污染。

2. 准备好所需器材:准备好无菌的移液管、离心管、吸头等器材,确保它们都是无菌的。

3. 样品分装:按照抗体供应商提供的信息,确定分装的体积和浓度。一般来说,你可以根据实验需要将抗体分装成小体积的储存管中,这样可以减少多次冻融对抗体质量的影响。

4. 避免多次冻融:多次冻融可能会降低抗体的活性。因此,将抗体分装成适合单次使用的分量,可以减少冻融的次数。

5. 标记清楚:每个分装的管子上都应该标明抗体的名称、浓度、分装日期和存放温度等信息,以便后续使用时能够准确识别和管理。

6. 储存温度:根据抗体供应商的建议,选择合适的储存温度。大多数抗体可以在-20摄氏度储存,但某些抗体可能需要更低的温度,如-80摄氏度。

7. 快速冷冻:在分装完毕后,尽量快速将抗体冷冻起来,以减少冻融过程对抗体质量的影响。可以考虑使用液氮或冷冻盒来加速冷冻过程。

8. 防止阳光照射:避免将抗体暴露在强光下,因为光照可能会降解抗体的质量。

9. 避免震动:储存抗体的冰箱或冷冻箱应该放置在不受过多震动的位置,以防止抗体的变性。

总之,分装抗体需要在无菌、清洁的条件下进行,同时要遵循抗体供应商的建议和实验室的操作规程,以确保抗体的质量和稳定性。如果有任何不确定的地方,建议咨询实验室的老师或有经验的同事。

二甲亚砜(DMSO,Dimethyl sulfoxide)可以用作一抗稀释后的防腐剂,以延长抗体的稳定性。它在一些情况下可以帮助防止抗体的降解和减少冻融的影响。然而,使用二甲亚砜需要注意一些因素:

1. 浓度选择:通常情况下,二甲亚砜可以在1-10%的浓度范围内加入稀释后的抗体溶液中。具体的浓度选择取决于抗体的性质、用途和供应商的建议。一般来说,可以从低浓度开始尝试,然后根据实验的结果逐渐调整浓度。

2. 注意稀释:如果要在抗体溶液中加入二甲亚砜,首先需要将抗体稀释到所需的浓度,然后再添加适量的二甲亚砜。不要在抗体还未稀释之前直接将二甲亚砜加入,以避免影响抗体的稀释计算和性能。

3. 实验验证:在开始正式实验之前,建议先进行小规模的实验验证,以确定加入二甲亚砜后抗体的稳定性是否有所改善,以及是否会影响实验结果。

4. 储存条件:一旦添加了二甲亚砜,抗体溶液应该储存在干燥、避光的环境中,可以在-20摄氏度或更低的温度下保存。

需要注意的是,尽管二甲亚砜可以在一些情况下有助于抗体的稳定性,但并不是所有抗体都适合添加二甲亚砜。有些抗体可能对二甲亚砜敏感,或者添加后会影响其活性。因此,在使用之前务必查阅抗体供应商的建议并进行实验验证。最好与实验室的老师或同事讨论,以确保正确地使用和添加二甲亚砜。
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chenzhen2016[使用道具]
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