蛋白质与蛋白组学

怪不得，电流太小了，5*8的胶设定120-180mA的恒流30min 20K的蛋白转得就很好。不知道你目的蛋白有多大。

===========================================

我 的目的蛋白是70KD的,是否转移的时间要长一点呢?

。。。。我的半干转装置是恒流的，按照0.8mA/cm2,我的胶大小是5cm×8cm,转移的时候我设定的电流就是32mA。我去把电流调节大一点再转下看看。

===============================================================================

我晕，早就提醒你了，电流太小，应2mA/cm2，那么你用5cm*8cm的胶面积，应用至少80mA电流。

1。我去试试把“三明治”旁边的电转液吸干。
2。还有就是NC膜和滤纸的平衡时间是多久？我用的就是一般的滤纸，圆形的中速滤纸。不是whatman 3MM的那种。不知道是否有影响。
3。我的那个半干转仪器找不到说明书了，是一个黑黑的方型盒子，上面是正极，是石墨电极。没有标明牌子，看不出来。也没有电源灯，在整个转移过程中，电流恒定，电压从7V－13V。不知道这样会不会是“断路”的？“断路”会有哪些表现？
......

========================================================================================

针对性的回答你的问题：
1、电转液最好是吸干，用你剪滤纸的下脚料就足矣（省材料嘛，嘿嘿）；
2、滤纸的规格并不是很重要，用普通滤纸也可以。其主要作用就是提供一个离子环境；
3、我只是通过你的实验参数推测你的电转电路可能有问题。我们用的半干转膜仪15分钟搞定，其提供的电源是9V。
建议检查所有接头是否插好。
不知道你用万能表可不可以测一下电转仪正负极的电压或者电流。
Good luck！