蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】分离胶和浓缩胶的浓度

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 22  2/3 ‹‹123››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】分离胶和浓缩胶的浓度

gogo[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77052
精华 0
积分 821
帖子 1341
信誉分 100
可用分 7487
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-12
状态 离线
11

发表于 2014-5-7 17:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
12%是分离胶的浓度，3％是浓缩胶的浓度，这个浓度是指聚丙烯酰胺的总百分比数。而所谓的10％SDS是因为我们配胶的时候用到的SDS的储液浓度就是10％，不用去管的。
顶部
PINK[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 73133
精华 0
积分 418
帖子 536
信誉分 100
可用分 3488
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-19
状态 离线
12

发表于 2014-5-7 17:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不同浓度的胶,是指丙烯酰胺的含量不一样,其他的含量是一样的
顶部
jujuba[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79697
精华 0
积分 612
帖子 903
信誉分 100
可用分 5331
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-14
状态 离线
13

发表于 2014-5-7 17:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
建议你看看郭尧君的《蛋白质电泳实验技术》这本书，里面有胶浓度的具体算法
顶部
tuuu2[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77597
精华 0
积分 507
帖子 674
信誉分 100
可用分 4211
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-18
状态 离线
14

发表于 2014-5-7 17:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

看到几篇文献有个过程说:制备10%SDS聚丙烯酰胺凝胶（配制12％分离胶，配制3％浓缩胶），请问这个10％是怎么得出来的。平常所说胶浓度是指这个10％，还是分离胶的浓度？
这句话中的10%是指SDS的浓度为10%; 12%,3%则是指配制成的胶中聚丙烯酰胺的百分比数.
PS:平时我们一般不说SDS的浓度;说配制胶时如10%,12%,15%等都是指胶中聚丙烯酰胺的终浓度.
顶部
hot_hot_hot[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76450
精华 0
积分 389
帖子 498
信誉分 100
可用分 3247
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
15

发表于 2014-5-7 17:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

他说的10%SDS聚丙烯酰胺凝胶是指SDS的浓度是 10%吧 ,因为一般配制变性胶是加入的SDS其实浓度就是10%。而真正的胶浓度是他说的12％分离胶，配制3％浓缩胶。我是这么理解的。
我认为也是这样，12%分离胶，3%堆积胶
顶部
fei1226com[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79957
精华 0
积分 599
帖子 898
信誉分 100
可用分 5286
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-18
状态 离线
16

发表于 2014-5-7 17:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

每100ml凝胶溶液中含有单体和交联剂的总克数称凝胶浓度,常用T%表达
顶部
windy+++[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74130
精华 0
积分 490
帖子 720
信誉分 100
可用分 4343
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-6
状态 离线
17

发表于 2014-5-7 17:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

汪家政 《蛋白质技术手册》 里面有说明
可以通过电驴下载
顶部
remonte[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114516
精华 1
积分 356
帖子 387
信誉分 102
可用分 2698
专家分 10
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
18

发表于 2014-5-7 17:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
12%是分离胶的浓度，3％是堆积胶的浓度
顶部
remonte[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114516
精华 1
积分 356
帖子 387
信誉分 102
可用分 2698
专家分 10
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
19

发表于 2014-5-7 17:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

平常所说胶浓度是指分离胶的浓度，堆积胶的浓度一般用3%到5％，堆积胶只起到把不同泳道的不同分子量蛋白样品堆积在同一起跑线上，所以用低浓度的胶。堆积胶一般用较小电压跑，我习惯用80V，效果很好的，把不同分子量蛋白样品堆积在同一起跑线上后，也就是上样buffer的染料跑到分离胶时，可以适当加大电压到160V，效果很好。
顶部
04906[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73544
精华 0
积分 599
帖子 858
信誉分 100
可用分 5155
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-24
状态 离线
20

发表于 2014-5-7 17:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

10％是指分离胶浓度 (%T, acrylamide + bisacrylamide)。
一般而言10％, 12％ 或者是其他浓度的胶都只是改变分离胶的浓度，而堆积胶都固定在4％（或3％)，因为主要影响蛋白质分离程度的是分离胶，堆积胶只是将loading 後的蛋白质压缩成一细线（使所有蛋白质都在同一起跑点上）。而其後的分离胶利用其高浓度的 acrylamide + bisacrylamide所形成之筛孔来控制不同大小蛋白质泳动的速度（当然也同时配合蛋白质上附着的SDS量所造成的负电荷强度）。
顶部
 22  2/3 ‹‹123››