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标题:【求助】请教谁会用MASCOT这个软件

duoduo[使用道具]
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1
 

【求助】请教谁会用MASCOT这个软件

我有些数据需要用这个软件分析,这个软件是在cuturl('www.matrixscience.com')这个网站有,不知道我的数据处理完后,如何分析.
请高手帮忙分析.
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INK[使用道具]
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相关疾病:
电击伤
你是用MALDI-TOF做肽指纹谱(PMF)分析吧。
1.登录cuturl('www.matrixscience.com')
2.点击MASCOT
3.点击Peptide mass fingerprint
4.接着会弹出一个对话框
Your name
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Database :( MSDB NCBInr SwissProt Random )一般用MSDB和NCBInr
Taxonomy:你的目的蛋白来源的种属(如人类,微生物等)
Enzyme:你用来做胶内酶切的酶(多是Typsin)Missed cleavage:一般选1
fixed modification:一般同时选乙酰化和氧化,也可根据你的目的蛋白可能有的修饰进行相应调整
viarable modification:一般不选
Protein mass:可不填
Peptide tol.:肽段忍受度,看你仪器检测时设置的参数,如是0.3Da修改成0.3即可。
Mass values:一般选MH+
最后在Query中粘贴上你的所得的肽段分子量
Start search j就可以了。
还有:这个网址也许会对你有帮助。
cuturl('http://www.matrixscience.com/help/instruments_data_explorer.html')
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ladyhuahua[使用道具]
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3
 
fixed modification:一般同时选乙酰化和氧化,也可根据你的目的蛋白可能有的修饰进行相应调整

============================================

请教,为什么要选氧化,DTT的作用不是将-S-S-还原了吗?
为什么要选乙酰化, IAA的作用不是 烷基化吗?
谢谢
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wood533[使用道具]
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choose the desired types of modified residues to be searched:
a.specify modifications desired for cysteine residues to generate theoretical masses to match those cysteine-containing peptides that have been reduced and then alkylated with iodoacetic acid(carboxymethylation),iodoacetamide(carbamidomethylation),or 4-vinylpyridene(pyridylethylation)
b.specify additional chemical modifications of proteins that can be generated during PAGE,such as oxidation of methionine residues and acrylamide modification of cysteine residues.
c.specify peptide mass changes due to known posttranslational modifications,such as conversion of N-terminal glutamine to pyroglutamic acid,and phosphorylation of serine,threonine,and tyrosine.
d.For any database entry with a methionine at the N-terminus,specify whether the N-terminal peptide is to be considered in its original form or in a form where the methionine is removed and the penultimate amino acid is acetylated.
如果不是你自己做的质谱,最好咨询一下给你作质谱的老师。
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duoduo[使用道具]
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5
 


QUOTE:
原帖由 wood533 于 2014-5-28 15:57 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

choose the desired types of modified residues to be searched:
a.specify modifications desired for cysteine residues to generate theoretical masses to match those cysteine-containing peptides that hav ...


能否告诉我上面这段话来自什么地方?
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wood533[使用道具]
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回复 #5 duoduo 的帖子

不客气。 quoted from: Current protocols in protein science.
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ladyhuahua[使用道具]
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氧化是针对甲硫氨酸的。自己看看Cys的烷基化形式就知道为什么选乙酰化了---carbamidomeththyl(C)。 不过我一般是将Met氧化选为可变修饰的。
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u234[使用道具]
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我也趋向于将Met氧化选为可变修饰,看看你查出结果的匹配情况,并不是所有的肽段都是Oxidation,如果选固定修饰会减少匹配机率和得分.
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duoduo[使用道具]
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请问是氧化的甲硫氨酸的哪个键?
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syq唯爱melody[使用道具]
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求mascot软件。
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