【求助】我做的bradford标准曲线，请分析下原因

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标题:【求助】我做的bradford标准曲线，请分析下原因

bohe221[使用道具]
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发表于 2014-6-4 16:53 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我做的bradford标准曲线，请分析下原因
ug BSA OD595
0.0 0.0
0.1 0.222
0.2 0.273
0.4 0.328
0.6 0.377
0.8 0.431
1.0 Sad 0.469

附件

2014-6-4 16:53

92557347.jpg (21.58 KB)

jkobn[使用道具]
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发表于 2014-6-4 16:53 资料个人空间短消息加为好友

小中大

重做吧，原因很多。比如BSA的问题，操作问题或者酶标仪的问题，一般这个标准曲线相关系数要大于0.98才有意义。

yhz1973[使用道具]
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发表于 2014-6-4 16:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

建议尝试BSA浓度分别为：0，31.25，62.5，125，250，500，750，1000ug/ml
我们做曲线是用这样的浓度的，最后这个标准曲线相关系数要大于0.996

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发表于 2014-6-4 16:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 yhz1973 于 2014-6-4 16:54 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

建议尝试BSA浓度分别为：0，31.25，62.5，125，250，500，750，1000ug/ml
我们做曲线是用这样的浓度的，最后这个标准曲线相关系数要大于0.996

这31.25、62.5等你浓度怎么配比较方便呐？由于提纯不容易，我用的是微量bradford法

PINK[使用道具]
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发表于 2014-6-4 16:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

重做一次吧，可能是由于加bsa是量不够准，也可能是酶标仪不够稳定。我也作过很差的，但最终作出来的很漂亮。

bohe221[使用道具]
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发表于 2014-6-4 16:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可不可以把你做的bradford具体操作发给我呀。我用微量bradford法，取0，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0mg/ml等BSA浓度5ul，加到400ulCoomassie里，很容易由于枪头取5ul液体时沾壁而产生误差

PINK[使用道具]
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