小中大我是个新手。我用离子交换进行分离多肽时，所有多肽在用buffer冲一个柱体积的时候就被洗脱下来的，是不是说明没有被挂上？但是洗脱下来的穿过峰是三个分离得很好的峰。为什么多肽没被挂上柱还能被分离呢？
我用的是CM sepharose FF，starting buffer的pH是4.4。
我所用的胶有分子筛的功能吗？
后来用0－2M NaCl梯度洗脱没有东西下来。
我的离子柱体积是120ml左右。
流速是2ml/min，比较慢吧。
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1、离子柱体积120ml，好大啊。CM-sepharose交换能力很强的，1mlCM.FF能结合70mg核糖核酸酶呢！你的小肽有那么多吗，如果有，也建议你先走一个小的预装柱看看，摸好条件再放大来做。
2、你的Starting bufferpH是4.4，你的目的肽等电点是多少？如果是5-7，那用CM就不如DEAE合适了，CM是分离碱性蛋白的，一般pH7时，碱性蛋白都能挂上了。
