【求助】浓缩方法

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标题:【求助】浓缩方法

wu11998866[使用道具]
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发表于 2014-6-8 10:36 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请教各位大侠蛋白质浓缩方法除了冻干还有什么有效方法望赐教谢谢！~

flower-201[使用道具]
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发表于 2014-6-8 10:37 资料个人空间短消息加为好友

小中大

超滤浓缩,透析袋包埋PEG度可以啊!

am10[使用道具]
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发表于 2014-6-8 10:37 资料个人空间短消息加为好友

小中大

超滤浓缩是一种非常有效的手段，冻干容易使部分蛋白失去活性。

2541[使用道具]
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发表于 2014-6-8 10:38 资料个人空间短消息加为好友

小中大

用固体PEG20000来浓缩，几分钟就有效果，把蛋白装到透稀袋里，扔到PEG2000里，PEG20000烘干了后还可以反复利用。

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发表于 2014-6-8 10:38 资料个人空间短消息加为好友

小中大

PEG20000烘干会结成很硬的块，那还能用吗？

jujuba[使用道具]
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发表于 2014-6-8 10:39 资料个人空间短消息加为好友

小中大

是不是也可以用浓缩管离心浓缩啊?

wu11998866[使用道具]
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发表于 2014-6-8 10:39 资料个人空间短消息加为好友

小中大

超滤浓缩会使样品量减少吗？它的死体积有多少？谢谢大侠指教！

greenbee[使用道具]
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发表于 2014-6-8 10:39 资料个人空间短消息加为好友

小中大

关于超滤
我们有两种
一种是超滤管，有容积有5ml，1ml等，截流的分子量有10k，5k，3k等，适用于少量的制备及活性检测！上面的部分有浓缩及分离的作用。这种也是millipore的，基本不会有太大的损失！
一种是超滤仪，较常用的millipore的实验室型，超滤仪，关键是膜包，一般有50kd，30kd，5kd等，都很贵！，死体积？是什么意思，这个仪器是循环的，当分子量大于膜包孔径，就会通过上面的循坏通路回到tank中，浓缩的最小体积由20-30毫升，因为最后有个磁力搅拌的小槽，以及部分管路，所以最少是20多毫升，注意，千万不要把膜包堵住，这样压力会明显增加，对仪器也不好。
如果做蛋白可以将超滤仪器放在4度的环境下进行操作。这样对保持活性有好处。

wu11998866[使用道具]
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发表于 2014-6-8 10:40 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢指教！
关于超滤仪！我们新进了一台我还不会用
用之前是不是的过0.45um的膜还需要注意什么？谢谢指教！