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标题:【求助】蛋白电泳总是跑歪

wanglaoshi[使用道具]
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发表于 2014-6-9 16:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】蛋白电泳总是跑歪


我做的蛋白质电泳老是跑的不直，很歪，蛋白标准最后都跑出去了，请问是怎么回事呀？是和电压有关还是说胶做的不好，一般电压是选择120吗？
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ending[使用道具]
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发表于 2014-6-9 16:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

1 首先考虑是胶的问题，丙烯酰胺的纯度要高。
2 做胶时，梳子孔不能做歪了！
3 我们电压一般在积层胶80V，分离胶130V！
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zhenxin[使用道具]
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发表于 2014-6-9 16:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果排除仪器试剂的问题，除了电流的影响外，也可能的是你的样品本身的缓冲体系的问题
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jkobn[使用道具]
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发表于 2014-6-9 16:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
检查电泳槽是否放正，电解两极是否平行。
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了了[使用道具]
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发表于 2014-6-9 16:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你的胶放正了吗？
我有过这种经历，用的六一的迷你槽，跑出来的带都是歪的，结果发现玻璃板在放的时候放偏了……
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dog002[使用道具]
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发表于 2014-6-9 16:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你的所有加样孔都用上了吗，我以有没用完的孔，空着跑就好歪，后来我把剩余的孔加上上样缓冲液来跑，这样就不会歪了
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windy+++[使用道具]
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发表于 2014-6-9 16:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

换新配的10%APS试试，1.5的小管分装－20度保存，用完一管在解冻下一管。
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wanglaoshi[使用道具]
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发表于 2014-6-9 16:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我跑的不只是歪，而且越往下带越宽，呈梯形的了，请问有谁能帮我解决以下。谢谢！
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caihong[使用道具]
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发表于 2014-6-9 16:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

盐浓度太高也会导致这种情况，我跑的时候如果相邻两条道盐浓度相差太大就会出现这种情况，一般超过200mM都得透稀处理下再跑
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