【求助】请教酶的解冻问题和甘油怎么准确吸出10微升

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标题:【求助】请教酶的解冻问题和甘油怎么准确吸出10微升

taoshengyijiu[使用道具]
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发表于 2014-6-9 21:30 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请教各位，我辛苦的从细胞里提取出酶来，加等体积的甘油保护，置于－70度保存，现在的问题是用的时候怎么解冻才能最小限度的不让酶失活？还有我的实验要求能准确的吸10微升酶出来，但甘油太粘了，用加样枪怎么也吸不出来，所以，还请各位多多指点，不盛感激。

mybioon[使用道具]
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发表于 2014-6-9 21:30 资料个人空间短消息加为好友

小中大

可以先拿出来放在-20度一段时间，然后再放入4度一段时间让其融化。
你要吸取10微升酶，那就要吸取20微升的混合液，注意要混匀，用枪吸不出来不应该啊，即使是纯的甘油也能吸出来的，要缓慢的吸取和打出。

taoshengyijiu[使用道具]
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发表于 2014-6-9 21:49 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢两位，关于解冻我老板说让我在室温放一会，再拿到37度里水浴加热，我今天还被老板骂说这么简单的事情也不知道，真的就是这样做的么？酶的活性没有影响么？甘油我老板也让我在37度里温一下再吸。具体我还没做的不知道结果怎么样。还有顺便问一下，提取蛋白甘油需要消毒么？我是高压蒸汽灭菌的，也不知道是不是这个原因，甘油粘度增大呢？多多指点啊！

milkdog[使用道具]
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