【求助】电泳转膜条件

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标题:【求助】电泳转膜条件

daod[使用道具]
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发表于 2014-6-10 17:25 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我以前做小分子量目的蛋白时,浓缩胶是5%,分离胶是10%,转膜是50mA,3h。
最近要做大分子量目的蛋白，分子量约140kD，却不知该用什么样的条件？在网上又没有查找到，所以恳请高手给以指导。谢谢了

shenkunjie[使用道具]
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发表于 2014-6-10 17:25 资料个人空间短消息加为好友

小中大

试试120V，100min。

fox_79[使用道具]
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发表于 2014-6-10 17:26 资料个人空间短消息加为好友

小中大

继续用浓缩胶是5%,分离胶是10%,转膜电流为：转膜面积（cm2）*0.65
转移2h

kuaizige[使用道具]
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发表于 2014-6-10 17:26 资料个人空间短消息加为好友

小中大

蛋白转移有没有公式可以估计转膜条件？

XYZQ[使用道具]
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发表于 2014-6-10 17:26 资料个人空间短消息加为好友

小中大

140kD的蛋白我一直在做，浓缩胶是5%,分离胶是8%比较好，转膜用湿转300mA 2.5小时，我一直在做，效果很好

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发表于 2014-6-10 17:27 资料个人空间短消息加为好友

小中大

那跑胶用什么条件呀?和小分子量的一样吗?即浓缩胶80v,分离胶100v,这可以吗

xue258[使用道具]
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发表于 2014-6-10 17:27 资料个人空间短消息加为好友

小中大

最近一直在做大分子量蛋白，120、170、190 都作过，一般page 浓缩胶80v,分离胶100v,即可，转膜360 mA 75 分即可

49888[使用道具]
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发表于 2014-6-10 17:28 资料个人空间短消息加为好友

小中大

转膜用的电流以及时间是如何计算的呀?有没有什么公式呀

vivian4123[使用道具]
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发表于 2014-6-10 17:28 资料个人空间短消息加为好友

小中大

两张膜, 半干转, 300mA, 2h, OK
没问题,绝对行的