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标题:【求助】请问GLUT4稀释浓度

newway[使用道具]
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发表于 2014-6-12 09:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】请问GLUT4稀释浓度


下午就做WESTERNBLOT 一抗GLUT4的稀释浓度是多少呢 急啊 谢谢
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dog002[使用道具]
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发表于 2014-6-12 09:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

看你是什么材料来源了，1：500作为起始稀释比例吧
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newway[使用道具]
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发表于 2014-6-12 09:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢 我是羊抗鼠的好似 能不能稀释的大点呢 比方说1:10000
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dog002[使用道具]
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 小中大
你是什么材料啊
如果是细胞的话，本身就不多，稀释的太过了就出不来条带了啊
可以试一下1：1000
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发表于 2014-6-12 09:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

二抗或许可以稀释的大一些，一抗最好先确保能做出来，然后再考虑降低稀释度节省抗体
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发表于 2014-6-12 09:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

是蛋白质 我查了是按照1:2500 不知道能不能在大一点 稀释
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dog002[使用道具]
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发表于 2014-6-12 09:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

是蛋白质是什么意思啊？是纯化的蛋白么，如果那样的化是可以稀释的更低，这都是可以摸索出来的。你的说明书上如果写了按1：2500，那根据你的结果，如果1:2500能做出很强的条带，那么就还可以稀释再用。
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newway[使用道具]
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 小中大
是啊 是纯化的 骨骼肌GLUT4蛋白 我按照1：2500 稀释一抗 做出了很多条带呢 我能否按照1：5000稀释呢 急啊
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dog002[使用道具]
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发表于 2014-6-12 09:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

封闭时间要注意下，封闭液用牛奶还是bsa？
1：2500都能出条带说明你的蛋白量还是很多的，可以考虑再稀释
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