蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】天然小分子多肽的分离纯化，如何做凝胶过滤

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】天然小分子多肽的分离纯化，如何做凝胶过滤

finger[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 71816
精华 0
积分 574
帖子 787
信誉分 100
可用分 4799
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-8-31
状态 离线
1

发表于 2014-6-14 11:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】天然小分子多肽的分离纯化，如何做凝胶过滤


各位达人，您们好；
我有一个小分子多肽的混合物，成份很多，分子量范围在800---5000，我想从中得到单一的肽段，分子量大概为2000左右，欲作凝胶过滤，我想用伯乐公司的bio-gel P-4的填料，但不知道哪个公司可以在很短的时间拿到这个产品？另外，我想请教各位达人这个填料是否合适？如果用这个的话，我的分离系统需要不需要制备性高压液相？因为我这里没有制备性高压液相。除了他，有没有其他的办法可以使用这个柱子？还请达人赐教？
顶部
one[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73393
精华 0
积分 697
帖子 1114
信誉分 100
可用分 6353
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-22
状态 离线
2

发表于 2014-6-14 11:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你说的填料我没用过，估计你需要用HPLC反相才能分开，你先试试吧
顶部
lxh031[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76425
精华 0
积分 335
帖子 389
信誉分 100
可用分 2726
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
3

发表于 2014-6-14 11:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

bio-gel P-4是伯乐公司的软胶，类似PAGE，不能用高压液相。你的样品胶过滤恐怕不成，没那么高分辨率。应该象版主说的那样，只能用RPC HPLC才分得开。
顶部
finger[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 71816
精华 0
积分 574
帖子 787
信誉分 100
可用分 4799
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-8-31
状态 离线
4

发表于 2014-6-14 11:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我只是想把我的复杂样品先粗分一下，再用反相分离，请问您用过bio-gel P-4伯乐公司的填料吗？他分离小肽效果怎麽样?
顶部
fsdd817[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 78590
精华 1
积分 590
帖子 795
信誉分 102
可用分 4841
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-30
状态 离线
5

发表于 2014-6-14 11:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

粗分选择离子交换也许会更好,凝胶柱子很难把差别分子量几百的的分开.没多少希望.
顶部
lxh031[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76425
精华 0
积分 335
帖子 389
信誉分 100
可用分 2726
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
6

发表于 2014-6-14 11:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
，我试过DEAE-FF分离人胰岛素51肽和去八肽人胰岛素，结果盐梯度分得很开（相差8个AA），我以前做过合成肽的分离8－20个AA，离子交换用做粗分离效果不错的。BIO的P系为聚丙烯酰胺基质，sephadex G为葡聚糖基质，都是软胶有操作压限制，操作性及分辨效果不会太理想的。
顶部
finger[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 71816
精华 0
积分 574
帖子 787
信誉分 100
可用分 4799
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-8-31
状态 离线
7

发表于 2014-6-14 11:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
非常感谢您，也非常感谢韦老师，那我用离子交换做的话，我想用强阳离子做，填料用哪种类型的合适呢？还请各位达人指点。谢谢了。。。。
顶部
lxh031[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76425
精华 0
积分 335
帖子 389
信誉分 100
可用分 2726
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
8

发表于 2014-6-14 11:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

sp-sepharose FF是强阳，CM是弱阳，它们工作pH范围有所不同，看你手头有什么填料了，再有你目的肽的性质来选择了，结果试了才能知道。
顶部
33号[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74277
精华 0
积分 549
帖子 757
信誉分 100
可用分 4611
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-9
状态 离线
9

发表于 2014-6-14 11:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

离子交换我觉得BIO-RAD和AMERSHAM做的都挺好的，但是你要选凝胶过滤的化，还不如用amersham ,它做的更好，我现在就用的是superdex 系列的
顶部
qqq111[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73201
精华 0
积分 830
帖子 1238
信誉分 101
可用分 7086
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-20
状态 离线
10

发表于 2014-6-14 11:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

superdex peptide 分离范围100－7000d，应该可以试试。
顶部