蛋白质与蛋白组学 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】请教获得 AP-1 EMSA 阳性结果的一些问题

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

标题:【求助】请教获得 AP-1 EMSA 阳性结果的一些问题

lyxsqs[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114503
精华 0
积分 213
帖子 146
信誉分 100
可用分 1500
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
1
 

【求助】请教获得 AP-1 EMSA 阳性结果的一些问题

大侠高手们:
有两个问题想请教大家,
1. 用什么药品处理那种细胞能得到AP-1的EMSA实验阳性结果!!! 急急急!!! 请各位老师大侠高手指教!!!
2. 另外,我经常做非放射性EMSA实验,有时候我的一些样品加样后谈真都已经跑到底部了,可化学发光成像得时候结果显示要检测的蛋白-探针结合物去还在加样孔,没有跑出来,但相同得实验条件下其他的样品还是跑得不错,这种现象一年前我都碰到过了,只是偶尔出现,想在试验过程中得到解释,可是做了这么长时间,这么多实验,还是没有个合理的说法!
请各位老师,大侠,高手赐教,帮帮我分析一下可能的原因!
谢谢!!
顶部
mamamiya[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72974
精华 0
积分 653
帖子 986
信誉分 100
可用分 5763
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-16
状态 离线
2
 

主要原因在加样孔,加样孔没有冲洗干净,导致蛋白滞留。
顶部
mamamiya[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72974
精华 0
积分 653
帖子 986
信誉分 100
可用分 5763
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-16
状态 离线
3
 

要看您是什么细胞,如果是成纤维细胞,用TGF-b可以刺激获得阳性结果。
顶部
lyxsqs[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114503
精华 0
积分 213
帖子 146
信誉分 100
可用分 1500
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
4
 
但是跑样品的其他的加样孔都是依次冲洗的,都没有卡在加样孔,而且这个样品卡过好几会
顶部
lyxsqs[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 114503
精华 0
积分 213
帖子 146
信誉分 100
可用分 1500
专家分 0
阅读权限 255
注册 2013-9-25
状态 离线
5
 

我手上有A549细胞,K562细胞,Meg01细胞,不知道大侠们知道怎样处理能得到这三种细胞的AP-1 EMSA阳性!!! 我查了一些文献都没有提到!
顶部