【求助】关于page胶的加样孔！！

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标题:【求助】关于page胶的加样孔！！

绿茶公子[使用道具]
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发表于 2014-6-14 22:02 资料个人空间短消息加为好友

小中大

最近刚开始做western，拔梳子的时候不知道怎么样才能减少气泡？？有资料说边加水边拔，还说要拿电泳缓冲液冲洗加样孔，可是我实在是费了很大劲才把加样孔里的水弄出来，而且不能彻底弄干净。请大家指点！谢谢！！

hold住[使用道具]
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发表于 2014-6-14 22:02 资料个人空间短消息加为好友

小中大

看来你确实是WB新手,不要紧！经验来自于实践积累,如果能够看学长做一次,收获会更大!
1.如果胶配好后暂时不做电泳,拔去梳子,不用冲洗直接用保鲜膜包好后置于4度冰箱,可以存放1W,园里有人提到也可以室温下存放3天,试过好象效果不好;
2.如果配好的胶要立即进行电泳,拔梳子的时候不可加水！确如你说,水在梳孔里不好排出,影响到后续的电泳。你可以直接装好玻璃板,在内槽里加1×SDS电泳缓冲液淹没加样孔,里面的气泡自然就排出;
3.梳孔的冲洗也在加满电泳缓冲液后进行,用1ml注射器吸缓冲液冲洗即可,用力要适度;
供参考!

绿茶公子[使用道具]
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发表于 2014-6-14 22:02 资料个人空间短消息加为好友

小中大

还有个问题就是如果我把电泳缓冲液淹没加样孔后，怎么再加样呢？？“3.梳孔的冲洗也在加满电泳后进行,用1ml注射器吸缓冲液冲洗即可,用力要适度;”那我洗完加样孔以后再拿出来加样吗？？不好意思没太明白哈

prettygirl@[使用道具]
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发表于 2014-6-14 22:03 资料个人空间短消息加为好友

小中大

用玻璃微量加样器（注射器，50ul）或者直接用20ul移液器在加样孔上样即可；
一个很重要的因素你要考虑：上样样品含有上样缓冲液，有甘油成分，其比重大于电泳缓冲液，只要在上样孔加样，样品也会自由落入孔底，不必伸入到孔底加样，你可试试！

ladyhuahua[使用道具]
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