【求助】western中怎样才能把条带跑得细一点？

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标题:【求助】western中怎样才能把条带跑得细一点？

abc816[使用道具]
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发表于 2014-6-17 11:22 资料个人空间短消息加为好友

小中大

样品是组织蛋白，上样量20ul（蛋白40ug），每次跑出来条带都散开的
用的是4％的浓缩胶，跑浓缩胶时看到溴酚蓝压的很细，跑到分离胶就会变粗好多，尝试过增加浓缩胶的长度及延长浓缩胶的凝固时间效果都不好，请教高手如何解决？谢谢。

vcve[使用道具]
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发表于 2014-6-17 11:22 资料个人空间短消息加为好友

小中大

曝光后片子上条带很粗吗？蛋白有多大？如果分离胶浓度高，跑的时候溴酚兰是会扩散的比较开。

u234[使用道具]
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发表于 2014-6-17 11:23 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我的也是
在浓缩胶跑得好好的
分离胶就有点散了

tuuu2[使用道具]
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发表于 2014-6-17 11:24 资料个人空间短消息加为好友

小中大

有高人解决一下吗?我也是这种情况.

eve_49[使用道具]
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发表于 2014-6-17 11:27 资料个人空间短消息加为好友

小中大

跟电泳槽有点关系,用BIO-RAID的随便跑,条带都很漂亮

zsxan1990[使用道具]
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发表于 2014-6-17 11:28 资料个人空间短消息加为好友

小中大

注意电压了吗

duoduo[使用道具]
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发表于 2014-6-17 11:28 资料个人空间短消息加为好友

小中大

BIO-RAD的mp3是western的最佳选择，条带会很漂亮的

glass[使用道具]
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发表于 2014-6-17 11:28 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我的情况也是这样,电泳的电压分别是80 和120V,电转是200MA,条带比较粗,不是那么细细的一条,不好看,请教高人.

abc816[使用道具]
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发表于 2014-6-17 11:29 资料个人空间短消息加为好友

小中大

电压80和100V
转膜1mA/cm2
目标蛋白40－50kD

vcve[使用道具]
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发表于 2014-6-17 11:30 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我觉得胶浓度太低了，用１０％的试试看

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