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标题:【求助】跑双向第二向时，电压程序是怎样的呢？

qhyu[使用道具]
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发表于 2014-6-17 15:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】跑双向第二向时，电压程序是怎样的呢？


我用的是Bio-rad公司的二向系统，采用恒流。
有的战友说刚开始的电压与跑出的结果有关，我刚开始都是20V的样子，结果不大好。请问电压或电流与蛋白质进入PAGE胶有什么影响呢？
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mimili_901[使用道具]
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发表于 2014-6-17 15:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我们二向的条件如下：
15℃，衡功率的条件下进行，先以每胶2.5W电泳30 min，而后每胶17 W电泳约5 h，直至溴酚蓝指示线到达凝胶底边处。
其实，这个二向电泳和western 电泳是一样的。
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qhyu[使用道具]
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发表于 2014-6-17 15:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问，你们用的 是哪个公司的仪器呢？
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qhyu[使用道具]
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发表于 2014-6-17 15:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

bio-rad公司不是推荐恒流吗???
你用恒压跑出来的效果怎么样呢?跑完一张胶需要多少时间呢?
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duoduo[使用道具]
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发表于 2014-6-17 15:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
大胶板大概需要2-3个小时!效果不错!我们实验室一直用的恒压跑的第二向!不过应该注意及时冷却胶板!其实我觉得这个恒压恒流到是其次,主要的还是电压或者是电流大小合适就行!
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greenbee[使用道具]
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发表于 2014-6-17 15:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

刚开始的电流应该要小些才好吧,但电流不能太小防止扩散和逆流,等看指示剂完全进入浓缩胶并形成一条线后再加大电压(稳压)跑.
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