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标题:【求助】我做Western中的2个问题

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发表于 2014-6-17 16:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】我做Western中的2个问题


1，我孵了一抗以后， 在大约目的带的位置，膜变透明了，是什么原因啊？二抗以后更明显，就像煮熟了一样
2，X光胶片和有荧光的的膜一起放在盒子里就曝光了， 原理是什么呢？难道有X光，还是加了ECL发光底物索发出的荧光就是X射线？？Question
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avi317[使用道具]
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发表于 2014-6-17 16:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

1.请问你用的是不是PVDF瞙？
2.ECL发光可以使X光片感光。
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发表于 2014-6-17 16:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

1是啊是啊， 就是pvdf膜， 是正常的么？
2哦，这样啊，明了 ，谢谢！那用一般的胶片行不行呢？
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发表于 2014-6-17 16:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
唉？为什么啊！？我用PVDF膜，立春红染色后看见的蛋白带居然也是透明的！
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发表于 2014-6-17 16:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你转膜以后
干燥充分了吗
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发表于 2014-6-17 16:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

1.我没用过PVDF瞙 ，但是我看别人用PVDF瞙做过，他们做的比较成功，我看他们的瞙有那种现象，PVDF瞙要用甲醇处理的。
2.我用的是医用的X光胶片，胶片不仅对X光可以感光而且可见光也可以感光的，如果你去过临床的放射科你就可以发现，他们的胶片都是蔽光的，胶片对红光不敏感，因此洗片的时候暗房里用的是红灯。胶片对绿光和蓝光敏感，如果你做发光的时候 比较强的话，可以看到条带是绿色荧光，因此容易感光就是很正常的事情了。
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发表于 2014-6-17 16:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果要用立春红染色，要把膜用甲醇20％处理两分中，然后用丽春红 染色 就出带了 。
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发表于 2014-6-17 16:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

转完膜我先用甲醇处理，然后自然干燥了的。
请问，你看见的人们在膜透明以后，做出来了吗？还是你的意思是说，在看见透明以后还要用甲醇处理？
我是转完膜后先用甲醇处理，然后自然干燥，然后孵一抗就看见透明了，然后PBS洗，然后孵二抗透明常常更明显了，然后洗，然后曝光显影但都可以看见透明的带呢
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发表于 2014-6-17 16:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

她们在瞙透明的时候 ，可以做的出，不过不是很透明，感觉是半透明的。不过她们好像是在转瞙前 用甲醇处理吧，你看一下PVDF瞙的说明书，她们说是按照说明书做的。
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