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标题:【求助】帮忙看看positive staining是什么意思?

pencil菲[使用道具]
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发表于 2014-6-18 11:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】帮忙看看positive staining是什么意思?

近日向一SCI杂志投稿, 要求修改, 但一审稿人的意思不懂,特请教各位.
一审稿人针对我的HO-1 western blot的条带, 提了以下问题
Page 33. Where does positive staining exactly present? How to quantify the difference of the staining?
positive staining 是什么意思, 我知道免疫组化有positive staining , 不知道western 的 positive staining 是什么意思?审稿人叫我干吗?. 第二个问题是问蛋白表达如何定量吧?
多谢
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ritou1985[使用道具]
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发表于 2014-6-18 11:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

1.Where does positive staining exactly present----加个蛋白Marker.
2.How to quantify the difference of the staining?----作个内参.
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发表于 2014-6-18 11:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

多谢, 但我的图上如何加蛋白Marker. 是在图上加上HO的分子量,如32KD. 还是像PCR一样在条带旁边加分子量marker吗? 从来没看到别人文献有这样加的啊? 是叫我像免疫组化加个阳性对照吗?
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发表于 2014-6-18 11:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

就是问你你的阳性条带在哪儿，怎么才能看出你的阳性条带，言下之意就是你的内参每设好，举例来说，比如你的目的条带30Kd，那么在你的电泳图片上没有marker的话其他人怎么才能知道你的30Kd大小的条带在哪儿的意思。
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pencil菲[使用道具]
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发表于 2014-6-18 11:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我们电泳时用蛋白marker,HO-1的分子量是32kd, 所以我们把20到40KD的胶切下来,转膜,曝光, 就只有一个条带既HO-1条带, 在我的文稿上, 也只有一条阳性条带, 我标上HO-1. 电泳图上的marker转膜后,曝光后marker不能显示. 那要如何解释啊?
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redbutterfly[使用道具]
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发表于 2014-6-18 11:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这种情况的话好象只能重复你的实验直到出结果为止吧,marker显示不出来就是你跑胶的问题了,只能重新做了Sad不知道我说的对不对,请各位指正啊~~
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pencil菲[使用道具]
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发表于 2014-6-18 11:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的胶上当然有marker显示出来，但转膜,曝光后，蛋白marker不显影（蛋白marker本来在胶片上不显影的），在胶片上只有HO－1的条带显影，我的图上只有一个条带，我标上HO－1，应该很清楚的。还是不明白审稿人的意思，各位大侠多帮忙，在写给审稿人回信，实在不知如何回答
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