小中大我的样品是20KD－70KD的蛋白，用了15％的胶跑，跑不开。今天换了10％的和12％的胶还是停留在上样处，跑不下去。请各位帮帮忙，是怎么回事呢？我用的是那种国产的小电泳槽，3％的浓缩胶（45v）跑了半小时后换电压（147～150）跑了4个半小时后停止。
10％胶是30％ACR1.665ml，pH8.8Tris－Hcl1.25ml，H2O2.35ml，AP和T均为25ul
12％的胶是30％ACR2ml，pH8.8Tris－Hcl1.25ml，H2O1.75ml，AP和T均为25ul
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你跑的是非变性电泳（native PAGE),这种情况我遇见过。在变性的SDS-PAGE时没有问题，但跑native PAGE时就是跑不下来。即便是减小胶的浓度效果也不明显。在排除操作和仪器的原因后，原因可能是样品中含有较多的核酸和脂类，（尤其是核酸）带负电，分子量也比较大，堵塞凝胶孔。建议对样品采用超速离心或者加入核酸酶处理。
