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标题:【求助】为什么我15％的胶跑得这么恐怖啊？

JK.jon[使用道具]
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发表于 2014-6-20 16:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
试一下在样本上样前12000转/min离心五分钟，再上样，这样也许对你有帮助，我试过的，挺好，还有胶要凝透了，跑出来的带直，胶的浓度可以多试几个，有时候丙稀酰氨的浓度不是30％而是40％（仔细看说明书），这样如果安分子克隆上的胶浓度配会配出来的大于书上的说，做western blot真是个大学问呢

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12000转离5分钟的话，会分层的吧？
上哪一部分？
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JK.jon[使用道具]
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发表于 2014-6-20 16:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我们用20mA的稳流跑，溴酚蓝就会横向扩散，改成100v稳压的就好了，你可以试试看。

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溴酚兰横向扩散是什么意思？
如果是蛋白横向连成一条线的话
我们一般是因为蛋白上样量过大
而我们实验室用恒流或者恒压跑胶似乎效果差别不太大
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summerxx[使用道具]
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发表于 2014-6-20 16:42 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

上周刚跑了15%的胶,100V的电压跑了两个半小时,条带非常锐利.
我感觉是你的胶没有充分混匀.
重新配AP,电泳缓冲液,缓冲液的PH值很重要,我的PH调在8.3,不知你的是多少?
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