【求助】marker为什么会越跑越宽？ - 经验共享

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标题:【求助】marker为什么会越跑越宽？

xue258[使用道具]
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发表于 2014-6-20 16:53 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 loli 于 2014-6-20 16:53 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
楼上所谓的纵向条带宽和窄是从溴酚兰看出来的么？

不是，无论横向和纵向都是指蛋白条带（包含marker）。横向融合在蛋白上样量极大时出现的更明显，这个大家都深有体会。
溴酚兰经常发现扩散，但它仅是个电泳的指示剂，其扩散与本身的质量好坏成反比，和本身含量高低成正比，和时间成正比，不能全然代表蛋白的泳动情况，也不能反映蛋白的横向扩散情况。蛋白的纵向改变与扩散没有关系，靠两端电压（泳动动力，是蛋白迁移的基础）和胶阻力（孔径阻力，是蛋白分离的基础，与胶浓度成正比，与蛋白分子量成正比）二者维持。

cwcwcww[使用道具]
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发表于 2014-6-20 16:53 资料个人空间短消息加为好友

小中大

个人认为纵向扩算是肯定存在的，但是纵向扩算并不是楼主问的问题的关键所在，
纵向扩散主要是由于胶的孔径大小不一引起的，但是这种差别并不大，但是如果是比较长的胶，这种作用累积起来就可以发现胶的条带变宽
成梯形我觉得主要是横向扩散引起的，在电泳过程中，离子运动是有电场作用的电泳的方向和自身热运动的方向叠加而成的，想抑制条带变宽变型这里可以采用降低电泳温度（在冰浴中电泳）在旁边的孔道中加入蛋白的方法减弱横向扩散。

qhyu[使用道具]
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发表于 2014-6-20 16:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我们用的都是进口预染marker，可是我做的也是有时候会括有时候跑的不错。

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