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忙活了几天,可结果仍不理想Sad
用梯度浓度还原型谷胱甘肽洗脱(1mM、2.5mM、5mM、10mM)都试了,还是同时洗下来,然后又试了HiPrep 16-60 Sephacryl S-200 ,结果还是没分开,这个柱子根G50的原理差不多吧。
这是过分子筛后的图:分别为过分子筛之前、过分子筛之后收集的不同管的液体(过柱的条件上样量200微升但浓度较高,0.2ml/min,柱体积16-60,洗脱是用50mM tris PH=8,每一毫升收集一管)。最后的那个泳道也有杂带,只是不太清楚,比较弱。如果在样品中加SDS是不是能有助于分离?加的量又应该是多少呢?请高手帮帮忙吧