小中大我也感觉我的样品处理有些问题。我使用的是BIO-RAD 的全蛋白提取试剂盒。细胞培养在60mm板中,用冷的PBS洗后再用水洗一遍,然后加入400ul提取液(7M尿素,2M硫脲,1%ASB-14去污剂,40mM Tris 碱,0.001%嗅芬蓝,1%TBP),加完后的溶液确实很粘稠,有点象软软的鼻涕状,跟核酸溶解的样子很象。
但是楼上所说的Dnase I and RNAse A酶,我担心这是人为的在样品中加入蛋白质,增加样品的复杂性,这样可行吗?
TCA/丙酮法,透析等方法,虽然增加了样品提取时的步骤,使得批次之间的变异程度提高,但是这是针对核酸类物质的好方法,楼上可以提供个这个方法的链接吗?