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标题:【求助】蛋白脱盐浓缩的好办法

天蝎座[使用道具]
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发表于 2014-6-21 17:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】蛋白脱盐浓缩的好办法


我的蛋白过了肝素的柱子后盐的浓度很高，我想脱盐又不伤害蛋白的活性，有什么好办法啊，那位请指点一下，我用过Amicon（10kD） 超滤杯反复洗两次后几乎检测不到蛋白，损失特别的大，另外想先用HI-TRAP的脱盐小柱或透析先脱盐再浓缩，这样分步做损失可能会小一点，有没有那位有更好的建议啊，急死我了，SOS
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49888[使用道具]
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发表于 2014-6-21 17:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
凝胶柱除盐效果就不错，收率高，但是会稀释样品．
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wawa[使用道具]
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发表于 2014-6-21 17:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

低温透析
处理量还大
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天蝎座[使用道具]
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 小中大

感谢两位,但是这都只能除盐,却不能浓缩啊
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vivian4123[使用道具]
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发表于 2014-6-21 17:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
又脱盐又浓缩就是合适大小的超滤膜了吧
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fsdd817[使用道具]
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发表于 2014-6-21 17:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

又脱盐又浓缩就是合适大小的超滤膜了!
这个确实是,但是超滤膜一般都会吸附很多蛋白,30-40%都可以算正常值.你不想损失那么多，只能多用水洗膜,这样还是达不到理想的浓缩效果吧!
建议:浓缩用透析袋包埋PEG的办法,脱盐要看你蛋白特性了,盐浓度大还是选择过脱盐柱比较好,透析透干净需要的时间比较长!
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发表于 2014-6-21 17:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

蛋白吸附没有那么大的
选择亲水滤膜，蛋白浓度不要太低，正常收率应该在95%以上。
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fsdd817[使用道具]
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发表于 2014-6-21 17:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我说的一点都没夸张，吸附的多少应该和蛋白的不同有关。
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66小飞侠[使用道具]
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发表于 2014-6-21 17:40 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

用丙酮等有机溶剂浓缩试试，这样即可以浓缩，还可以脱盐。
但是活性会损失一些，而且脱盐可能也没有那么的彻底。
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vivian4123[使用道具]
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发表于 2014-6-21 17:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

超滤吸附除了看蛋白的性质，还要看膜的选择。
蛋白吸附30~40%只能说明工艺条件没有优化好，绝对不是正常现象！
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