小中大【求助】看看我的2D胶，帮我找找原因好么？
为了能得到大家的更好的帮助，我把故事说的详细一点。
样品：组织分离细胞，大小与HepaG2细胞相似
方法：取7×10的6次方个细胞（如一粒米大小），加入1ml裂解液（6M尿素，2M硫脲，4％CHAPS，40mM Tris，50mM DTT，抑肽素，亮肽素，PMSF，DNAse，RNAse）裂解细胞，冰上超声（超2s，停5s，共2min），28000g×1小时离心，取上清，定量为12mg/ml
上样：取25ul样品＋125ul水化液（配方与裂解液类似，缺少Tris，蛋白酶抑制剂和核酸酶）
电泳：7cm 3－10，4－7
50v水化12h
250v 30min
1000v 1h
4000v 3h
4000v 24000vh
500v 保持
平衡：按照bio－rad方案
6M 尿素，SDS 2％，Tris－Hcl 375mM，甘油20％
平衡一，每10ml＋0.2gDTT 15min
平衡二，每10ml+0.25g碘乙酰胺 15min
SDS-PAGE： 12％胶
初始电流：5mA/gel
加大电流后：16mA/gel
结束后：考染4h，脱色，扫描
上面的是3－10，下面的是4－7
最后感谢各位耐心的看完这个故事，请帮我找找胶的原因好么？
