小中大【求助】有人做过聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳吗？
我想做这个实验，问了一下别人说这个电泳和SDS差不多，只是需要梯度混合仪，但是我看文献上说得试剂都配的不一样啊？有人有具体的操作方法吗？告诉我好吗？
文献上要配的试剂如下：
聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳法测定蛋白质的相对分子质量（Mr）
试剂和器材：
试剂：
1． 贮液（用于制备梯度胶）
（1） Tris 10.75g
硼酸 5.04g
EDTA 0.93g(EDTA.2Na.2H2O)
PH8.3
溶于蒸馏水中
定容至1000ml
(2) 丙烯酰胺 57.6g
亚甲基双丙烯酰胺 2.4g
溶于贮液（1）中
定容至100ml后过滤
(3) 丙烯酰胺 7.68g
亚甲基双丙烯酰胺 0.32g
溶于贮液（1）中
定容至100ml
(4) TEMED 0.3ml
溶于贮液（1）中
定容至100ml
(5) AP 0.3g
溶于贮液（1）中
定容至100ml
2. 电极缓冲液（0.09mol/L Tris,0.08mol/L 硼酸，0.0025mol/LEDTA(PH8.4)）
10.89g Tris
4.95g 硼酸
0.93g EDTA(EDTA.2Na.2H2O)
加水溶解，定容至1000ml
3.25%乙醇
4.0.1%溴酚蓝指示剂
5．固定液：10％的磺基水杨酸溶液
6．染色液[0.1% 考马斯亮蓝R250，25％甲醇，10％乙酸溶液]
1g考马斯亮蓝R250
溶于250ml 甲醇
加入100ml 冰乙酸
用水定容至1000ml
7. 脱色液[25％甲醇，10％乙酸]：
250ml 甲醇
100ml 冰乙酸
用水定容至1000ml
8．7％乙酸
