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标题:【求助】蛋白纯化纯度怎样检测啊？

qumm1985[使用道具]
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发表于 2014-6-21 18:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】蛋白纯化纯度怎样检测啊？


蛋白纯化纯度怎样检测啊？纯度达到多少就可以不过NI柱了？
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8princess8[使用道具]
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发表于 2014-6-21 18:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你要做什么用？表达的蛋白吗？
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hustwb[使用道具]
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发表于 2014-6-21 18:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

那要看你的使用目的了。
sds-page电泳时最常用的 方法。如果条件允许，也可以用高压液相色谱。都比较简单。
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qumm1985[使用道具]
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 小中大

我想做抗体，要检测纯度，那么从电泳上怎样能说明纯度呢
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hustwb[使用道具]
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发表于 2014-6-21 18:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
SDS-PAGE,除了你的目的带，其他的杂带越多说明越不纯，杂带越少说明纯度越高啊。
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qumm1985[使用道具]
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发表于 2014-6-21 18:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我是用SDS-PAGE和HPLC的方法测蛋白纯度的，SDS-PAGE用凝胶扫描仪扫描，里面有软件可以分析出胶上所有蛋白条带的含量，好像是通过比较蛋白条带染色情况得出的。
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windy+++[使用道具]
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发表于 2014-6-21 18:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我用SEPHADEX G-200包埋透析袋浓缩蛋白后进行SDS-PAGE为何没有条带呢？请各位高手赐教。
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feima+[使用道具]
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发表于 2014-6-21 18:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

做SDS-PAGE，然后用凝胶扫描仪扫描，再用bandscan分析，可以得出目的条带的含量。
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发表于 2014-6-21 18:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
feima+的意思是说尽管胶上考染后肉眼看不到条带，但凝胶扫描仪再微量的蛋白都能扫描到吗？我们学校没有这个仪器，请各位再帮我想想还有啥办法。浓缩后再作SDS-PAGE是不是可以？
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feima+[使用道具]
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发表于 2014-6-21 18:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
一般胶考染后肉眼都能看到，如果肉眼看不到那么凝胶扫描仪也看不到。
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