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标题:【求助】请教SDS-PAGE和WESTERN BLOT

tangxin_80[使用道具]
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发表于 2014-6-27 11:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

上样量一样就是指的上样体积，但蛋白浓度此前应该调整为一致的，这样体积和浓度全一致，跑出的条带才能够保持一致。
样品老是跑歪与胶底下有气泡应该是有关系的。
膜的蛋白面朝下的话，蛋白一般不会在平皿表面磨掉，如果不放心最好翻过来蛋白面向上放置，当然最好是这样放的啦。: -)
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蒲公英[使用道具]
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发表于 2014-6-27 11:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

开始把气泡全赶掉了，但是 跑的过程中还是会有气泡，怎么办？
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发表于 2014-6-27 11:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
关于SDS-PAGE的marker总是跑歪，我也遇到过这种情况．后来我尽量不把 marker上在最左或最右的泳道，其次上样的时候尽可能上一个泳道隔一个泳道，同时隔出来的泳道不要空着，也上一定体积的loading buffer．另外，　　marker中也可以加入适量的loading buffer，我这样做了以后觉得跑出来的图效果还不错．
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蒲公英[使用道具]
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发表于 2014-6-27 11:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你的电泳跑的好象有些快！“浓缩胶高度约齿下0.5厘米，分离胶高度约6.5厘米”浓缩胶的距离是不是小了点，这样可能在你拔梳子时候使浓缩胶与分离胶之间松动，试试1CM 吧！
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