【求助】纤维素酶的纯化

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标题:【求助】纤维素酶的纯化

sistis[使用道具]
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发表于 2014-6-27 16:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

大家好，我是个新手，现在想进行纤维素酶的纯化，不知道从哪里下手，请大家指教一下，非常感谢。

wmp1234[使用道具]
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发表于 2014-6-27 16:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

为什么要纯化呢？
纤维素酶是一个酶系，来源不同，构成和性质都不同，比如碱性纤维素酶一般至少有3种酶协同作用，很难做到纯化，也没有必要，除非你需要专门研究其中每一种成分的作用核机理
一般生产过程都是离心和结晶来制备的
还是要针对你所做的纤维素酶，从来源（真核、原核菌株）、组成核功能入手

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发表于 2014-6-27 16:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我刚筛选了一株产纤维素酶菌株－－青霉，现在想对它产的纤维素酶进行纯化，但是蛋白纯化这方面知识不清楚，我想请教一下，我应该做哪些准备工作？谢谢

wmp1234[使用道具]
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发表于 2014-6-27 16:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

主要还是看你研究纤维素酶的目的是什么，是了解它的功能还是应用特点，还是研究它的发酵工艺，如果在发酵这块，没必要搞纯化，以提高酶活和优化工艺为主，也有很多东西可以做
至于纯化，要先了解青霉产纤维素酶的现有报道，掌握酶系构成、提取、粗酶制备、检测方法等等，再考虑如何分离纯化不同组分。一般还是离子交换为主，先了解蛋白的分子量、等电点、表达量、疏水性质、聚合情况等等。

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发表于 2014-6-27 16:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

非常感谢您的指导帮助，我查了一些文献，现在算是懂了一点，实验过程中肯定还会有很多问题，到时候还请您多帮忙！

sistis[使用道具]
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发表于 2014-6-27 17:00 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你好，我现在遇上另外一个问题：我想分离Ｃx酶，它的分子量是４２ＫＤ，但是采用Ｇ７５过柱后，得到３５ＫＤ－７０ＫＤ五条蛋白带，请指点一下，我应该采用什么方法把４２ＫＤ的分纯．谢谢！

eric930[使用道具]
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